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目的本实验应用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,研究远端创伤后处理(Remote postconditioning of trauma, RPoCT)对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响,探讨RPoCT的脑保护作用是否与PI3K/Akt/GSK-3β信号通路相关。方法60只健康雄性SD大鼠,体重220-280g,随机分为4组(n=15)：假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、3h远端创伤后处理组(3hRPoCT组)和6h远端创伤后处理组(6hRPoCT组)。①Sham组：大鼠仅分离颈部血管,不进行大脑中动脉梗阻,除不插入栓线外,其他手术操作步骤同I/R组。②I/R组：参照Longa制作MCAO模型方法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。阻断大鼠右侧大脑中动脉90min后施再灌注。③3hRPoCT组：建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型方法同I/R组,在大脑中动脉再灌注后3h行于剑突下3cm处行腹部纵向切口,全长约2cm,逐层切开至脏层腹膜,切开后立即使用3-0慕丝线逐层缝合伤口并消毒。④6hRPoCT组：除RPoCT在大脑中动脉再灌注后6h施加外,其他手术操作步骤同3hRPoCT组。I/R组、3hRPoCT组和6hRPoCT组于大脑中动脉再灌注恢复后观察24h。四组大鼠于手术完成后3h、24h分别对各组大鼠用改良的神经功能缺损评分法(modified Neurological Severity Score, mNSS)进行评分。评分后处死大鼠取脑,用TTC染色法测定脑梗死容积；HE染色法观察脑组织形态；Nissl染色法计数存活神经细胞；免疫组化和Western blot法观察及测定缺血测海马区p-Akt、GSK-3β及p-GSK-3β(ser9)表达。结果①TTC染色：Sham组未见脑梗死；与I/R组比较,3hRPoCT组脑梗死容积虽有减小趋势但无显著差异(P>0.05);6hRPoCT组脑梗死容积显著减小(P<0.05)。②HE染色：Sham组缺血测海马CA1区神经细胞形态正常,排列整齐；I/R组和RPoCT组脑缺血测海马CA1区均出现细胞坏死,神经细胞数目减少,间隙增宽,体积减小,核固缩,染色质浓缩、边聚,组织疏松。但RPoCT组较I/R组脑缺血海马CA1区细胞层次更清晰,数目多且细胞形态较完整,间质水肿减轻。③Nis sl染色：6hRPoCT组缺血测海马区尼氏体染色平均光密度值较I/R组显著增加(P<0.05);3hRPoCT组缺血测海马区尼氏染色平均光密度值较I/R有增高趋势,差异不显著(P>0.05)。④免疫组化结果：两处理组p-Akt对比I/R组均有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)；同时两处理组GSK-3β水平也均高于I/R组,但是3hRPoCT组与I/R组比较差异不显著(P>0.05),6hRPoCT组则比I/R组显著增高(P<0.05)。⑤Western Blot结果：两个RPoCT组p-Akt对比I/R组均显著增高(P<0.05)；两个RPoCT组GSK-3β水平与I/R组相比均显著增高(P<0.05);6hRPoCT组的p-GSK-3β (ser9)较I/R组显著增高(P<0.05),3hRPoCT组虽有增高趋势但无统计学意义(P>0.05)。⑥神经功能缺损评分：脑缺血再灌注24h后,3hRPoCT组与6hRPoCT组神经功能缺损评分中位数较I/R组下降,但I/R组和两RPoCT组神经功能障碍评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论：脑缺血再灌注后6h施加远端创伤后处理,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其作用机制可能与激活PI3K/Akt/GSK-3β信号通路相关。