煤矿开拓区粉尘进入实验大鼠肺泡前后性质比较

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目的通过测定实验大鼠肺泡内粉尘和煤矿开拓区粉尘的二氧化硅的含量、成分、分散度、形貌、产生自由的能力并进行综合分析,探讨粉尘进入机体后,其性质(尤其是致病能力)可能发生的变化。方法收集邯郸煤矿开拓区粉尘初筛后,使用400目筛子湿筛回收粉尘。大鼠分为:染尘组5组(使用收集并筛分的开拓区粉尘)、生理盐水组1组(使用生理盐水)。利用筛选得到的粉尘配置成50mg/mL的悬浊液,每次染毒剂量为粉尘悬浊液1ml或者生理盐水1ml,采用非气管暴露法对大鼠染尘,染尘8次,每次间隔一周。分别于第一次染尘后1W、4W、8W、14W、20W,收集染尘组大鼠肺组织和肺泡内粉尘,收集生理盐水组大鼠的肺组织。肺组织用于制作病理切片,采用HE染尘,观察疾病的进展。检测染尘组大鼠肺内粉尘和煤矿开拓区粉尘的性质并进行对比:利用红外分光光度计检测粉尘中游离二氧化硅含量;利用场发射扫面电子显微镜观察粉尘形貌;利用光学显微镜计数粉尘分散度;利用ICP-MS检测粉尘中铁、铝、镁、锌、铜、锰、镉、镍、铅、砷、铬、硅、锑元素含量;利用荧光分光光度计检测粉尘在磷酸盐缓冲液中释放羟自由基的能力。结果1大鼠染尘后20周,皮毛暗淡无光泽、不爱动;肉眼观察,大鼠肺表面可见乳白色点状病灶,有沙粒感;肺组织HE染色切片可见成纤维细胞呈同心圆排列,出现典型的矽结节。生理盐水组大鼠外观和行为正常;肉眼观察,大鼠肺表面粉嫩柔软;HE染色切片可见肺组织结构正常,肺泡壁薄,未见炎症反应。2使用红外分光光度计检测现场粉尘和肺灌洗出粉尘α-SiO2含量,现场粉尘组、染尘后1W组、染尘后4W组、染尘后8W组、染尘后14W组、染尘后20W组α-SiO2含量分别为37.27%、37.26%、37.26%、37.25%、37.26%、37.25%,经重复测量方差分析,各组之间α-SiO2含量的差异无统计学意义(P<0.05)。3使用电感耦合等离子体(ICP-MS)检测现场粉尘和肺灌洗出粉尘的13种元素含量,Fe元素的含量随染尘时间逐渐增加。Al、Mg、Si、Pb、Mn、Ni、Zn、Cu、Cr、Sb、Cd、AS这12种元素,染尘组与现场粉尘组相比,含量减少。4使用激光共聚焦扫描电镜对粉尘形貌进行拍摄,从粉尘的形貌图可以看出现场粉尘的形状多为球形,大鼠肺灌洗液中提取的粉尘的形状多为块状、棱角状,少数粉尘边角锐利。5使用普通光学显微镜测定粉尘分散度,发现现场粉尘粒径在X≤2μm、2μm<X≤5μm、5μm<X≤10μm、X>10μm范围内的百分比分别为42.17%、36.17%、17.00%、4.67%。大鼠染尘后1周、4周、8周、14周、20周肺灌洗出粉尘的粒径≤5μm占90%以上,粒径在5μm<X≤10μm范围内的粉尘占2%到3.33%,而>10μm的粉尘只有不足1%。6使用荧光分光光度计检测粉尘释放羟自由基的能力,现场粉尘释放羟自由基的量为4.54×10-3μg/mg,大鼠染尘后1周、4周、8周、14周、20周肺灌洗出粉尘释放的羟自由基的量分别为5.45×10-3μg/mg、5.50×10-3μg/mg、5.71×10-3μg/mg、5.60×10-3μg/mg、5.59×10-3μg/mg。大鼠肺灌洗出粉尘在磷酸盐缓冲液中释放羟自由基的量高于现场粉尘,以染尘后8周肺灌洗出粉尘释放的羟自由基的量最多。结论1粉尘进入机体后,α-SiO2含量没有发生变化。2粉尘进入机体后,Fe元素的含量随染尘时间逐渐增加。Al、Mg、Si、Pb、Mn、Ni、Zn、Cu、Cr、Sb、Cd、AS元素含量减少。3形状不规则的粉尘颗粒更容易滞留在肺中。4粉尘进入机体后,>5μm的粉尘被排出体外,≤5μm粉尘颗粒可进入肺泡和细支气管,肺灌洗出粉尘的粒径≤5μm占90%以上。5大鼠肺灌洗液中的粉尘在磷酸盐缓冲液中产生羟自由基的能力高于现场粉尘产生自由基的能力。图9幅;表8个;参154篇。
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