胰岛素是血糖稳态的一个重要调节因子。异常的胰岛素分泌导致糖尿病的发生。大约99％以上的胰岛素是从胰岛B细胞中分泌的，胰岛素储存在一种名　　为胰岛素分泌囊泡的特定细胞器中，并且胰岛素是通过一些调节机制来分泌的。　　胰岛素的产生始于糙面型内质网，以前胰岛素原的形式存在，而且前胰岛素原经过一些生化反应转变成为前胰岛素。接着，前胰岛素从糙面型内质网运输到反式高尔基体中。高尔基体以未成熟分泌囊泡的形式释放胰岛素。在未成熟分泌囊泡转变成为胰岛素分泌囊泡的过程中，囊泡内环境的pH值逐渐降低，导致前胰岛素被蛋白酶剪掉C端肽链，形成具有生物活性的胰岛素。与此同时，形成的胰岛素以致密核的形式在囊泡中形成结晶体，囊泡上的一些前期转运蛋白和其他物质回到内膜系统中被重新利用或降解，这样就形成了可以转运到细胞膜的成熟囊泡。　　胰岛素分泌囊泡是胰岛素作用途径的重要一环，是胰岛素在细胞内的运输载体和生化信号枢纽之一，涉及到细胞内复杂的运输系统和多种细胞器，参与了膜融合的过程。　　因此，将未成熟囊泡和成熟囊泡分离富集就显得尤为重要。　　在此试验中，我们发展了一种不连续密度梯度离心的方法来分离囊泡。我们比较了不同的物质分离方法的优点和不足，分析了不同分离方法的适用范围和分离丰度，筛选确定了适合于胰岛素分泌囊泡的不连续密度梯度离心法。此外，从多种不同类型的梯度介质中，确定了Optiprep作为不连续密度梯度离心的介质。在成功分离两种类型的分泌囊泡后，采用BCA蛋白定量分析和免疫酶联来测定囊泡中胰岛素的含量，并探讨使用流式细胞仪进一步富集囊泡的可能性。