枯草芽孢杆菌、粪肠球菌上清液对感染后肠易激综合征大鼠SERT表达调控研究

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目的:肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)是临床常见的慢性复发性功能性胃肠病,它给患者的身心和经济都带来了巨大的负担。感染后肠易激综合征(Post-infection Irritable bowel syndrome,PI-IBS)为IBS的一种重要临床亚型,近些年对其致病因素和发病机制的研究一直是IBS研究领域的热点之一,但迄今为止,PI-IBS的病因及发病机制仍然不清楚。目前已有大量文献显示益生菌可安全有效地缓解IBS患者腹痛、腹胀、排便异常等症状,并减轻焦虑、神经过敏等精神状态,改善患者生活水平,其中枯草芽孢杆菌和粪肠球菌作为临床常用的两株益生菌,广泛应用于临床辅助治疗当中,但其治疗IBS的具体机制尚未有文献报道。已知IBS发病与机体5-羟色胺代谢异常密切相关,而其代谢又主要受5-羟色胺转运体调节,故本实验旨在用枯草芽孢杆菌和粪肠球菌上清液干预PI-IBS模型大鼠,评估两种益生菌上清液对大鼠肠道组织中5羟色胺转运体表达的调控作用。方法:选取66只成年SD雄性大鼠,分为对照组和模型组,模型组中利用空肠弯曲杆菌灌胃制作PI-IBS大鼠模型,定期监测记录大鼠一般状态和粪便排菌情况,待造模组大鼠停止排菌时,检测对照组和模型组大鼠肠道动力及结肠SERT蛋白表达水平,评估建模效果;再将模型组大鼠重新平均分为4个治疗组,利用磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer Saline,PBS)(A组)、枯草芽孢杆菌(B组)、粪肠球菌(C组)及枯草芽孢杆菌和粪肠球菌1:1等体积混合的上清液(D组)行灌胃治疗,每只每天2ml,保留对照组(M组),并予以等量PBS干预,治疗共持续4周,每周从各组随机选取等量大鼠处死并收集结肠组织,应用Western-blot技术检测组织内SERT蛋白的表达水平变化。应用SPSS 20.0统计软件包进行统计学分析,利用LSD和Dunnett’s T3方法比较组间差异结果,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:灌胃治疗期间,PBS治疗的A组模型鼠结肠蛋白表达水平均显著低于对照组M(P<0.05);在灌胃治疗前2周,益生菌上清液治疗组(B、C、D组)大鼠结肠SERT蛋白表达水平均出现不同程度升高,并在第2周达到最高值;在灌胃治疗后2周,B、C、D组SERT蛋白表达水平出现不同程度下降,B组在第3周降至A组水平(P>0.05),在第4周复升至1.5倍A组水平(P<0.05),而C、D两组均明显降低,并在第4周下降至A组水平(P>0.05);B、C、D组间比较发现,D组结肠SERT蛋白表达水平于前3周均显著高于B组(P<0.01),而在第4周显著低于B组(P<0.01);D组在第2周、第3周显著高于C组(P=0.027,P=0.029);C组SERT蛋白表达水平在第1周显著高于B组(P<0.01)。结论:枯草芽孢杆菌、粪肠球菌上清液均可上调PI-IBS大鼠结肠组织SERT蛋白表达水平。在短期治疗中,联合菌上清液上调结肠SERT蛋白的能力比单菌上清液好,粪肠球菌上清液上调结肠SERT蛋白的能力优于枯草芽孢杆菌,但随着治疗时间延长,三种细菌上清液的上调作用均出现不同程度下降,其中粪肠球菌及联合菌上清液下降更为明显。
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