【摘 要】
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目的:基于TLR4/NF-κB信号通路,通过建立体外弓形虫（Toxoplasmagondii,T.gondii）感染Raw 264.7细胞的感染模型和体内急性弓形虫感染模型,研究人参皂苷Rh2（Ginsenoside Rh2,GRh2）的抗弓形虫作用和对巨噬细胞中NO的含量及iNOS表达的影响。方法:（1）体外实验:通过MTT实验测定GRh2对Raw264.7细胞的安全浓度;使用Western b
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81660344）.2017-2020年； 国家自然科学基金资助项目（81260251）.2013-2016年； 吉林省科学发展计划资助项目（20190201149JC）；
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目的:基于TLR4/NF-κB信号通路,通过建立体外弓形虫（Toxoplasmagondii,T.gondii）感染Raw 264.7细胞的感染模型和体内急性弓形虫感染模型,研究人参皂苷Rh2（Ginsenoside Rh2,GRh2）的抗弓形虫作用和对巨噬细胞中NO的含量及iNOS表达的影响。方法:（1）体外实验:通过MTT实验测定GRh2对Raw264.7细胞的安全浓度;使用Western blot法检测GRh2的抗弓形虫作用。（2）体内实验:将雌性Balb/c小鼠以1 ×105个/只的剂量感染弓形虫强毒株RH构建急性弓形虫感染模型。每日灌胃给药GRh2（100 mg/kg）与磺胺嘧啶钠SD-Na（100 mg/kg）持续6天,末次给药结束后解剖各组小鼠,用显微镜计数和免疫荧光法检测小鼠腹腔中弓形虫,考察GRh2的体内抗弓形虫作用。（3）使用Griess法检测Raw 264.7细胞上清及小鼠血清中NO的含量;运用Western blot法检测Raw 264.7细胞及小鼠腹腔巨噬细胞中TLR4、NF-κB以及iNOS蛋白的表达;采用免疫荧光法检测Raw 264.7细胞中NF-κB p65的表达。结果:（1）体外实验:GRh2（20 μM,40μM,60μM,80 μM,100μM）对正常Raw 264.7细胞均无毒性;GRh2明显降低了 Raw 264.7细胞中T.gondii蛋白的表达（P＜0.001）。（2）GRh2显著抑制急性弓形虫感染小鼠腹腔中弓形虫的增殖水平（P＜0.05）。（3）GRh2明显降低Raw 264.7细胞上清及小鼠血清中NO的含量（P＜0.001;P＜0.05）;明显抑制弓形虫感染的Raw 264.7细胞及小鼠腹腔巨噬细胞中iNOS的表达（P＜0.001;P＜0.01）,显著下调TLR4信号通路（P＜0.01;P＜0.05）,同时抑制弓形虫感染引起的Raw 264.7细胞（胞浆P＜0.001;核P＜0.01）和小鼠腹腔巨噬细胞（胞浆P＜0.01;核P＜0.01）NF-κB p65核易位。结论:（1）GRh2具有良好的体内外抗弓形虫作用。（2）GRh2能够抑制巨噬细胞中TLR4/NF-κB信号通路的激活,并可降低iNOS（NO）的过度表达。
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