黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁,AFB₁）是由黄曲霉菌在特定条件下产生的毒性最强的次生代谢产物,广泛存在于玉米、花生等农产品中。槲皮素（Quercetin,QUE）是一种具有抗氧化、抗癌等生理作用的黄酮类化合物。本文拟研究槲皮素对AFB₁致大鼠肝细胞毒性损伤的保护作用及其机制。细胞计数（CCK-8）实验结果显示,AFB₁对BRL-3A细胞的IC₅₀为23μmol/L,而QUE在低于15μmol/L时未对BRL-3A大鼠肝细胞造成毒性损伤。利用QUE对细胞进行预处理24 h后,再将AFB₁作用于细胞24 h,通过对细胞增殖力、LDH、CYP1A2活性、活性氧（ROS）、脂质过氧化物（MDA）、抗氧化酶类（GST、SOD、CAT、GSH/GSSG比值）等指标的检测表明,QUE能够增强细胞抗氧化酶活性,降低LDH的释放和CYP1A2活性,提高细胞自身的抗氧化性,降低由AFB₁引起的MDA和ROS对细胞的氧化损伤程度及细胞毒性,进而保持细胞活力。AFB₁对BRL-3A细胞的凋亡作用表明,AFB₁可显著降低细胞ATP水平和线粒体膜电位,使细胞核形态发生改变,呈现不规则碎片化和浓染。而QUE预处理能够显著升高线粒体膜电位和细胞内ATP水平,减少细胞核的碎片化和浓染,降低DNA受损程度,抑制细胞凋亡的发生。RT-qPCR实验表明,AFB₁可引起促凋亡基因Bax的m RNA表达,而QUE处理组能显著提高Bcl-2基因的表达。因此,QUE还可以保护BRL-3A细胞免受线粒体介导的内在细胞凋亡。Western blotting实验表明,AFB₁显著抑制了AKt的磷酸化水平和Nrf2核转移的发生。然而,QUE预处理明显升高了AKt的磷酸化水平与细胞核中Nrf2的蛋白表达。由于AKt/Nrf2信号通路的特点,AKt/Nrf2信号通路的抑制可能是一个重要的毒性靶点,并且在QUE预处理后,能够增加细胞的抗氧化能力并减少细胞凋亡的发生。这表明,AKt/Nrf2信号通路可能是在BRL-3A细胞暴露于AFB₁后,对细胞发挥保护作用的一个主要机制。综上所述,QUE能够增加AKt磷酸化并且刺激Nrf2核转移,以激活AKt/Nrf2信号传导途径,并且调节其下游基因HO-1的表达,提高Ⅱ相酶活性,降低Ⅰ相酶活性,减轻AFB₁引起的细胞毒性及氧化损伤程度,增强BRL-3A细胞的应激抵抗力;同时,合理地调节细胞凋亡相关基因的表达。因此,QUE具有抗氧化和抗细胞凋亡的功能,以保护细胞免受AFB₁诱导的细胞毒性。