灰霉菌(Botrytis cinerea)侵染包括重要的粮食作物、经济作物和园艺作物等200多种作物物种,对温带和亚热带地区产生了重要的影响,在全球范围内造成严重的经济损失。枯草芽孢杆菌由于生长快、营养要求简单,并且产生的芽孢耐热抗逆性极强,在病害防治上有其突出的优势,有利于生防菌剂的生产、剂型的加工,同时该菌在环境中容易存活、定殖与繁殖这种特性使得生防菌剂的防效事半功倍。本文比较系统详尽地研究了不同浓度梯度的的枯草芽孢杆菌CQ 48h发酵滤液处理对灰霉菌菌丝生长发育、分生孢子生长萌发和分生孢子致病性的抑制效果,从细胞生理学、生物化学等水平探讨了CQ抑制灰霉菌生长发育和降低致病性的可能机制,主要结果如下:1.通过筛选获得了两株高活性菌株Nc6和CQ,可以抑制病原真菌B.cinerea的生长。由于CQ表现出更稳定的抗病效果,此后的实验中以CQ作为主要的实验对象。通过16s rDNA序列比对,确定了高活性菌株CQ属于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQ发酵滤液对灰霉菌B.cinerea菌丝的生长及形态、孢子的生成量、孢子的萌发和芽管伸长、生长量都有不同程度的抑制作用;洋葱表皮侵染实验表明,经过CQ发酵滤液处理后,番茄灰霉菌孢子侵染进程受到影响其中,发酵滤液浓度越高,抑制作用越明显。温度和pH对生防菌CQ的活性有一定影响,其活性成分耐受一定的高温,但是超过100℃高温时,活性大大降低;有一定的耐酸碱性,经过强酸强碱处理仍有部分活性,其中活性成分最适pH在7左右。2生防菌株CQ发酵滤液在番茄离体叶片上和温室番茄植株上,均表现出了较好的防治效果。生防菌株CQ发酵滤液以及激活蛋白普绿通和阿泰灵处理对番茄植株中的抗病酶类POD和PAL活性的影响与对照组相比,都有显著的提高。而实验表明CQ活性成分为其胞外分泌物,经硫酸铵沉淀、蛋白质纯化仪以及层析液相分离仪器对其进行初步提取并纯化,其产物对番茄灰霉菌有抑制作用。3.通过对CQ发酵条件的探索,明确了在LB液体培养基基础上添加10g/L的可溶性淀粉,及0.01 g/L VB2、Arg、Pro等,作为其发酵培养基最为合适;CQ发酵最适温度为28~30℃,最适pH在7附近;由于CQ发酵过程中对氧含量的需求,相同容积的锥形瓶,应尽量装取较少的发酵培养液。