【摘 要】
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目的研究发现孕期妊娠相关焦虑可以预测学龄前儿童的情绪症状和行为发育,并存在性别差异。本研究的目的是在不同队列中验证这种性别差异,并探究性别差异是否与胎盘组织中糖皮质激素反应基因甲基化水平有关。方法本研究依托于马鞍山优生优育队列开展。该队列于2013年5月至2014年9月,在安徽省马鞍山市妇幼保健院招募了3474名基线孕妇,排除不良妊娠结局162例和双胎39例后,纳入3273对单胎活产儿及其母亲,并
【基金项目】
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国家自然科学基金（81803248）；
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目的研究发现孕期妊娠相关焦虑可以预测学龄前儿童的情绪症状和行为发育,并存在性别差异。本研究的目的是在不同队列中验证这种性别差异,并探究性别差异是否与胎盘组织中糖皮质激素反应基因甲基化水平有关。方法本研究依托于马鞍山优生优育队列开展。该队列于2013年5月至2014年9月,在安徽省马鞍山市妇幼保健院招募了3474名基线孕妇,排除不良妊娠结局162例和双胎39例后,纳入3273对单胎活产儿及其母亲,并于产后随访子代生长发育情况。本研究选取其中2405对在孕晚期完成了妊娠相关焦虑评估并在4岁时完成了多动和情绪症状评估的母子对作为研究对象。采用本课题组自编的《孕产期母婴健康记录表》收集孕妇基线资料,使用《妊娠相关焦虑量表》评估孕晚期妊娠相关焦虑情况。由专门人员测量及记录孕妇身高、孕早中晚期血压、血糖和分娩前体重,并于分娩期摘录病案中的出生资料、收集胎盘组织。采用《婴幼儿健康记录表》收集母乳喂养信息,使用《长处与困难问卷（SDQ）》对4岁儿童的多动和情绪症状进行评估。根据《妊娠相关焦虑量表》评价的孕晚期妊娠相关焦虑症状得分排序,选取得分靠前和靠后的各300个胎盘组织进行后续表观遗传学研究。采用Methyl Target法检测胎盘组织中FKBP5、NR3C1和HSD11B2基因启动子区CpGs甲基化水平。探索性因子分析法获得糖皮质激素反应基因甲基化的显著正交因子（简称甲基化因子）。采用Logistic回归模型分析孕晚期妊娠相关焦虑与儿童多动和情绪症状的关联;甲基化因子得分与儿童多动和情绪症状的关联;线性回归模型分析孕晚期妊娠相关焦虑与甲基化因子得分的关联。上述Logistic回归和线性回归分析中均按儿童性别分层分析,并在足月儿和正常出生体重儿亚组中进行敏感性分析。使用PROCESS程序分析甲基化因子得分在孕晚期妊娠相关焦虑与儿童多动和情绪症状关联中的中介作用。结果纳入的2405名孕妇平均年龄为（26.63±3.60）岁。有713人（29.6%）在孕晚期有妊娠相关焦虑,平均年龄为（26.21±3.32）岁。孕晚期无妊娠相关焦虑组与有妊娠相关焦虑组的孕妇在年龄、孕期增重、文化程度、吸烟和分娩方式上的差异具有统计学意义（P＜0.05）。在控制混杂因素（孕妇年龄,孕前BMI、孕期增重、文化程度,家庭月收入、吸烟、饮酒、妊娠糖尿病、妊娠高血压、分娩方式和六个月纯母乳喂养）后,与无妊娠相关焦虑组相比,母亲孕晚期妊娠相关焦虑会增加男孩多动的发生风险（OR=1.54,95%CI=1.13～2.11）,女孩情绪症状的发生风险（OR=1.61,95%CI=1.15～2.24）。因子分析共提取了五个显著的正交因子（即甲基化因子）。仅在男孩中发现甲基化因子与孕晚期妊娠相关焦虑及学龄前儿童多动和情绪症状的显著关联性,具体为孕晚期妊娠相关焦虑与甲基化因子5得分呈负相关（OR=-0.50,95%CI=-0.87～-0.13）,因子5显著负载FKBP5。因子1得分会增加多动症（OR=1.80,95%CI=1.15～2.83）和情绪症状（OR=1.64,95%CI=1.03～2.59）的发生风险,因子4得分会降低情绪症状的发生风险（OR=0.53,95%CI=0.29～0.97）。因子1显著负载NR3C1,因子4显著负载HSD11B2。上述结果经敏感性分析后仍具有显著性。但是,本研究没有发现上述甲基化因子在妊娠相关焦虑与学龄前儿童多动和情绪症状的性别依赖性关联中的中介作用。结论孕晚期妊娠相关焦虑以一种性别依赖的方式预测学龄前儿童多动和情绪症状,这进一步佐证了之前的研究结果。此外,本研究发现胎盘糖皮质激素反应基因甲基化与妊娠相关焦虑和学龄前儿童多动和情绪症状的关联均存在性别依赖性,但并未发现中介作用。原因可能是本研究用于中介效应分析的样本量不够大（所有中介效应的把握度均＜80%）。胎盘糖皮质激素反应基因甲基化是否是孕期妊娠相关焦虑致儿童神经行为发育性别差异的表观遗传学机制还需进一步探讨。
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