第一部分线栓法复制脑缺血再灌注模型大鼠的方法研究目的：探索大鼠脑缺血再灌注模型的复制方法，对线栓法进行改进，将线栓法简化，让研究者更容易接受，使MCAO模型复制方法操作更容易，可重复性更稳定。材料与方法：将大鼠采用10%水合氯醛腹腔注射的方式麻醉，仰卧于手术台上固定，颈部正中及偏右部位用2.5%碘酒常规消毒，沿颈部正中右侧旁开0.5cm做平行颈部正中线的纵向切口，切口长约2cm。显微手术器械小心剥离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)、颈外动脉(ECA)。其中颈外动脉需尽量暴露长一些，约3-5mm，颈内动脉要一直分离至翼腭动脉处。在ECA的远心端，距离颈总动脉分叉约3-5mm处结扎ECA，然后用电凝器在结扎点的远心端电凝ECA，再用眼科剪刀在结扎点与电凝点之间剪断ECA，使被结扎的ECA成为游离的末端。然后用镊子牵引结扎点上的缝合丝线，将游离的ECA拉向鼠尾方向，这样，ECA和ICA几乎在一条直线上。用动脉夹分别夹闭颈总动脉的近心端和颈内动脉的远心端，再在ECA结扎点前端用纤维手术剪做一个“V”型小口，将栓塞线经ECA缓缓插入ICA，栓塞线进入ICA后即可打开ICA远心端的动脉夹。以栓塞线上的标记判断栓塞线插入的深度。当栓塞线的1.8cm至2.2cm之间的区域达到经总动脉分叉处时，即停止继续推进栓塞线。将颈外动脉连同栓塞线一同用缝合丝线结扎，固定在一起。观察颈外动脉残端无血液渗出，即可放开颈总动脉上的动脉夹，剪断各结扎点上的手术缝合线，分层缝合肌肉及皮肤，栓塞线尾端经开口处留于皮外。结果1.改良的栓线直径固定，插入血管过程顺利，避免了栓线头部膨大造成栓塞程度不一的情况。2.改良后的MCAO模型复制的线栓法具有操作简单，可重复性好等优点。结论：1.改良后的MCAO模型复制的线栓法具有操作简单，可重复性好等优点。第二部分眼针调节脑缺血再灌注模型大鼠炎症反应机制的实验研究目的：探索眼针疗法对脑缺血再灌注模型大鼠炎症反应的抑制作用及其机理。材料与方法：将大鼠分为空白对照组、假手术组、模型组、眼针组、眼针对照组（眼周非穴区组）、体针对照组六组，每组8只。模型组，眼针组，眼针对照组，体针组大鼠均进行脑缺血再灌注模型复制，按照缺血1小时后进行再灌注，再灌注即刻开始对眼针组，眼针对照组，体针组进行相应针灸疗法治疗。再灌注24小时后处死取材，采用ELISA法检测各组大鼠血清中COX-2，PGE2，IL-1β含量；实时定量PCR法检测PGE2及IL-1βmRNA表达；Western blot法检测COX-2蛋白表达。结果：1.模型组大鼠血清中COX-2，PGE2，IL-1β含量显著升高，与空白对照组比较有统计学意义；眼针治疗组及体针治疗组大鼠血清中COX-2，PGE2，IL-1β含量较模型组有所降低，有统计学意义；眼针对照组与模型组比较变化不显著，没有统计学意义。2.各组大鼠海马组织中的PGE2及IL-1βmRNA的表达水平变化趋势与血清中PGE2及IL-1β的含量变化趋势基本相同，脑缺血再灌注损伤上调了大鼠海马组织中PGE2及IL-1βmRNA的表达，而眼针，体针治疗能够显著下调其表达。3.模型组大鼠海马组织中COX-2蛋白的表达上调，明显高于空白对照组；眼针，体针治疗组能够显著下调COX-2蛋白的表达；眼针对照组COX-2蛋白的表达与模型组差别不显著，没有统计学意义。结论：1.眼针能够下调脑缺血再灌注模型大鼠COX-2，PGE2，IL-1β的表达。2.眼针能够抑制脑缺血再灌注模型大鼠的炎症反应的发生。3.眼针疗法抑制MCAO模型大鼠炎症反应的机理可能与其能够下调前炎性因子IL-1β以及炎症介质COX-2，PGE2有关。4. IL-1β诱导COX-2的表达，COX-2进一步催化花生四烯酸合成前列腺素G2，PGG2受过氧化物酶催化生成前列腺素H2（PGH2），PGH2受到下游细胞外特异性酶的催化合成PGE2，此级联反应在炎症反应中发挥着重要的作用。眼针疗法的抗炎作用可能通过抑制此级联反应的发生而实现。第三部分眼针对脑缺血再灌注模型大鼠ERK1/2信号转导通路影响的实验研究目的：探索脑缺血再灌注损伤后ERK1/2信号转导通路的激活情况，研究眼针疗法对该通路的影响。材料与方法：将大鼠分为空白对照组、假手术组、模型组、眼针组、眼针对照组（眼周非穴区组）、体针对照组六组，每组8只。模型组，眼针组，眼针对照组，体针组大鼠均进行脑缺血再灌注模型复制，按照缺血1小时后进行再灌注，再灌注即刻开始对眼针组，眼针对照组，体针组进行相应针灸疗法治疗。再灌注24小时后处死取材，采用Western-blot方法对各组大鼠海马组织中ERK1/2及p-ERK1/2的表达进行检测。结果：1.脑缺血再灌注损伤后，大鼠海马组织中ERK1/2蛋白表达水平显著下调（p＜0.05）；而眼针疗法能够显著上调脑缺血再灌注损伤后大鼠海马组织中ERK1/2蛋白的表达，与模型组比较，眼针组ERK1/2蛋白表达显著升高（p＜0.05），有统计学意义。2.脑缺血损伤后，再灌注24小时，p-ERK1/2表达较空白组显著降低（p＜0.05），有统计学意义。而眼针，体针干预能够显著上调p-ERK1/2的表达（p＜0.05）。均有统计学意义。结论：1.脑缺血再灌注24小时后，ERK1/2及p-ERK1/2表达均受到抑制。2．眼针疗法能够显著上调脑缺血再灌注模型大鼠ERK1/2及p-ERK1/2的表达3.眼针疗法的脑保护作用可能通过激活ERK1/2信号转导通路而实现。4.眼针疗法可能是通过激活脑缺血再灌注模型大鼠的ERK1/2信号转导通路而实现其抑制炎症反应发生作用的。