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目的:成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)是一种牙源性肿瘤,发生于颌骨,其具有侵袭性生长和术后易复发的特点。AB的临床表现为生长缓慢的无痛性肿胀,鉴于疾病早期症状不明显且缺乏有效治疗措施,严重影响患者生存质量。近年来研究表明,微小RNA(microRNA,miRNA)与肿瘤密切相关,是肿瘤诊断、治疗及预后判断的潜在靶标。应用生物信息学分析,筛选出在AB中差异性表达的miRNA-524及其相关靶点白细胞介素-33(interleukin,IL-33)。IL-33是白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)家族的成员,在多种类型的细胞中表达。细胞损伤或坏死时释放出具有活性的成熟IL-33,激活免疫系统并提供了损伤信号。IL-33及其受体ST2和IL-1受体辅助蛋白(IL-1 receptor accessory protein,IL-1RAcP)形成IL-33/ST2信号通路。近年来研究表明,IL-33/ST2利用免疫调节、血管生成、肿瘤侵袭和转移等机制,在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用。因此,探讨miRNA-524、IL-33和ST2在AB中的表达及临床意义,为寻找AB的新治疗靶点提供科学依据。研究方法:1、应用Human miRNA表达谱芯片技术,筛选与AB相关的差异性表达的miRNA-524,采用茎环法实时定量PCR检测在14例AB及正常口腔黏膜组织(NOM)中的表达情况。2、应用生物信息学方法寻找mi RNA-524的靶点IL-33,采用qRT-PCR检测IL-33的mRNA和统计学分析初步验证其两者相关性。3、应用qRT-PCR和Western Blot在AB及正常口腔黏膜组织中检测IL-33和ST2的表达。4、应用免疫组织化学染色实验方法,在90例AB蜡块和20例NOM组织蜡块中检测IL-33和ST2的表达水平。结果:1、miRNA芯片分析发现,实验组(AB)miRNA表达量与对照组(NOM)比较后,其中变化在2.0倍以上,并且差异有统计学意义(P<0.05)的miRNA确定为差异表达的miRNA。miRNA-524在AB组织中比正常组织平均低8.96倍(P<0.001),差异最明显。综合生物信息学分析等多重筛选条件,最终确定miRNA-524为下一步研究的miRNA分子,应用茎环法实时定量PCR检测miRNA-524在AB中的表达比NOM低8.19倍(P<0.05)。2、应用Spearman相关性分析发现miRNA-524与IL-33在AB中的表达具有负相关性(r=-0.886,P<0.05)。3、应用qRT-PCR检测IL-33表达高于NOM1.39倍(P<0.05),ST2在AB中的表达是在NOM的1.76倍(P<0.05);Western Blot检测IL-33在AB中的表达高于NOM2.75倍(P<0.05),ST2在AB中的表达是NOM的2.16倍(P<0.05)。4、应用免疫组织化学染色检测IL-33在AB中的表达强度高于NOM,IL-33分布于肿瘤性上皮细胞的细胞核中,间质中炎性淋巴细胞、浆细胞阳性表达,偶见单核细胞阳性染色,内皮细胞、成纤维细胞和骨周边破骨细胞也见表达;ST2在AB中的表达强度也是高于NOM的,ST2分布于肿瘤性上皮细胞的胞质中,间质中炎性淋巴细胞、浆细胞阳性、单核细胞表达,胞核偶见阳性染色,内皮细胞、成纤维细胞和骨周边破骨细胞也见表达。结论:1、miRNA-524在AB中低表达,IL-33可能是与miRNA-524关系密切的潜在靶点。2、与NOM相比,AB中IL-33和ST2的表达增强。