“两系法”杂交水稻是水稻育种的发展方向,籼型温敏核不育系是应用最广泛的两系不育系类型。其育性主要受tms5基因控制。杂交粳稻相对杂交籼稻发展很慢,实用型不育系的缺乏是一个重要的原因。迄今两系不育系的培育主要通过常规杂交选育,选育周期长且每一代都涉及低温繁殖问题,并伴有连锁累赘。因此,研究培育粳型两系不育系的新技术具有重要意义。基因组编辑技术是新近建立并发展迅猛的现代分子技术,能高效定向改良受体目的性状基因。本研究利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术敲除粳稻武津粳1号和L11B的温敏核不育基因tms5,经过1代繁育,结合分子鉴定,获得了遗传稳定且不含转基因的温敏核不育系,证实利用CRISPR/Cas9技术是培育粳稻两系不育系的高效新方法。本研究主要完成了以下工作:（1）构建了tms5基因的CRISPR/Cas9载体;（2）利用农杆菌介导法转化武津粳1号和L11B两份开花习性较好的粳稻材料,分别获得武津粳1号阳性转化株16株,L11B的阳性转化株16株;（3）对T₀代阳性转基因植株进行tms5靶位点测序分析。T₀代植株中有16株在靶标位点发生了突变。23℃冷灌处理繁种;（4）选取T₀代tms5突变株,种植T₁代群体,利用Hyg标记筛选不含潮霉素抗性基因单株;通过花粉镜检和扩增tms5靶位点并测序,筛选得到12株不含转基因成分的T₁代纯合单株。割蔸,长沙10月份田间自然低温繁种,得到不育系下一代株系。