【摘 要】
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该研究初步探讨了小型猪超数排卵、胚胎回收及胚胎干细胞(ES细胞)和胚胎生殖细胞(EG细胞)的分离培养条件.以期为进一步研究和建立小型猪超数排卵技术,并成功建立猪ES/EG细胞
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学
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该研究初步探讨了小型猪超数排卵、胚胎回收及胚胎干细胞(ES细胞)和胚胎生殖细胞(EG细胞)的分离培养条件.以期为进一步研究和建立小型猪超数排卵技术,并成功建立猪ES/EG细胞系奠定基础.该研究共分两个部分:一、小型猪超数排卵与早期胚胎的手术回收.采用手术法从贵州(GZ)、广西(GX)、西双版纳(XB)和五指山(WZ)小型猪子宫内回收早期胚胎,结果四个品种小型猪的胚胎回收率分别为79.6%、77.5%、79.3%和80.8%;头均采卵数分别为5.5±2.5、5.6±1.8、3.8±1.2和7.0±1.0,各组间无显著差异(p>0.05).分别用PMSG+hCG法和PMSG+PG+hCG法对小型猪进行超数排卵,结果表明PMSG+PG+hCG法的头均排卵数(12.2±4.9)明显高于PMSG+hCG法(2.0±5.3,p<0.05).二、小型猪胚胎干细胞和胚胎生殖细胞的分离.将7日龄小型猪胚胎随机分成三组,比较MEF、PEF、STO饲养层对猪ES细胞分离的影响,结果表明STO饲养层最适于小型猪ES细胞的分离,其克隆形成率(24.5%)明显高于MEF组(1.6%,p<0.001)和PEF组.在采用STO饲养层的情况下,7日龄和9日龄小型猪胚间的原代克隆形成率大体相同,差异不显著(p>0.05).从小型猪PGCs分离培养结果来看,在小型猪全能干细胞建系过程中,EG细胞的研究可能是很有价值的.
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