饲粮中添加酪蛋白磷酸肽对产蛋后期海兰褐蛋鸡蛋品质和钙代谢的影响

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产蛋后期蛋鸡的肠道衰老会降低其对钙的吸收能力,导致蛋壳质量下降,是影响蛋品质的重要因素之一。较差的蛋品质在鸡蛋的运输保存过程中会导致蛋的破损率提高,对经济效益造成负面影响。因此,从营养调控的角度提高肠道对钙的吸收利用对改善产蛋后期蛋品质具有积极的意义。酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides,CPP)作为一种生物活性肽,在促进机体的钙(Ca)、铁(Fe)等矿物元素吸收方面具有良好的作用。因此,本研究在蛋鸡基础饲粮中添加不同浓度的CPP,探究其对产蛋后期蛋鸡产蛋性能、蛋品质、蛋壳超微结构、抗氧化性能及蛋壳腺和肠道相关功能的影响,为CPP在蛋鸡生产中的应用和产蛋后期蛋鸡饲料添加剂产品的开发提供参考依据。试验选取健康的58周龄的海兰褐蛋鸡800只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复20只鸡。T1(对照组,饲喂基础日粮),试验组T2、T3、T4、T5分别在基础饲粮中添加0.5、1.0、1.5、2.0 g/kg的CPP。试验结束当天每个重复随机取5枚鸡蛋,用于蛋品质的测定。用扫描电镜观测蛋壳的超微结构,用试剂盒测定蛋壳中的Ca、P、Fe含量;采样当天试验鸡进行翅下采血,蛋壳腺和肠道黏膜留样,血清生化指标、蛋壳腺及肠道酶活性用相关试剂盒测定,蛋壳腺和肠道酶活性的相关基因表达量首先用ND-1000紫外分光光度计在OD260和OD280下检测RNA的浓度和纯度,RNA反转录合成cDNA,后进行荧光定量PCR;将试验鸡的胫骨置于Instron3367双柱电子测试仪下检测其强度。结果显示:(1)饲粮中添加CPP后,试验组的破损率均低于对照组(P<0.05),且随着CPP添加水平的升高,破损率呈线性降低(P=0.046)及先降低后升高的二次曲线变化(P<0.05)。饲粮中添加CPP对蛋鸡的产蛋率、蛋重、采食量和料蛋比均无显著影响。(2)T2、T3、T4组蛋黄颜色均高于T1组(P<0.05),随着CPP添加水平的升高蛋黄颜色呈先升高后降低的二次变化(P=0.002),对蛋黄率无显著影响(P>0.05)。T4组蛋壳厚度高于T1、T2组(P<0.05),随着CPP添加水平的升高蛋壳厚度呈线性增加(P=0.006)。试验组蛋壳颜色均高于对照组,且随CPP添加水平的升高蛋壳颜色呈线性增加及二次关系(P<0.05),对蛋壳率无显著影响(P>0.05)。哈氏单位、蛋形指数和蛋白高度各组间差异均不显著(P>0.05)。(3)饲粮中添加CPP后对蛋壳栅栏层厚度和晶体层厚度呈线性升高(P<0.05),T3、T4、T5组有效层厚度显著高于T1组(P<0.05),且随着CPP添加水平的增加,有效层厚度呈线性增加(P=0.001)及先升高后降低的二次曲线变化(P=0.027);T2、T3组乳头结节数显著高于T1组(P<0.05),且随着CPP添加水平的升高,乳头结节数呈先升高后降低的二次曲线变化(P=0.006)。饲粮中添加CPP对不同组间的乳突层厚度及乳突间隙宽度无显著影响(P>0.05)。(4)T2、T3组蛋壳Ca含量均高于T1组(P<0.05),随着CPP添加水平的升高,Ca含量呈先升高后降低的二次曲线变化(P=0.021)。饲粮中添加CPP对蛋壳P含量无显著影响(P>0.05)。T2、T3组蛋壳Fe含量均高于T1组(P<0.05)。(5)饲粮中添加0.5 g/kg的CPP组血清Ca含量高于对照组(P<0.05),随着CPP添加水平的升高,Ca含量呈先上升后降低的二次曲线变化(P=0.022);饲粮中添加0.5、1.0 g/kg的CPP组血清ALP活力低于对照组(P<0.05);饲粮中添加CPP对血清中P含量和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活力无显著影响(P>0.05)。(6)饲粮中添加CPP对十二指肠中Ca2+-ATP活性呈二次曲线变化(P=0.007);饲粮中添加0.5 g/kg的CPP组CA活力高于对照组(P<0.05)。(7)饲粮中添加CPP线性增加了蛋壳腺CA活力(P=0.01);饲粮中添加0.5、1.0 g/kg的CPP组CaBP-D28K活力高于对照组(P<0.05),随着CPP添加水平的升高,CaBP-D28K活力呈先上升后降低的二次曲线变化(P=0.015)。饲粮中添加CPP对蛋壳腺中ALP活力无显著影响(P>0.05)。(8)与对照组相比,饲粮中添加1.5 g/kg的CPP可以上调十二指肠中CaBP-D28k的相对表达量(P<0.05),且随着CPP添加水平的升高,CaBP-D28k的相对表达量呈线性增加(P<0.05);饲粮中添加CPP对NCX的相对表达量呈线性增加(P<0.05),添加1.0和2.0 g/kg的CPP组NCX的相对表达量高于对照组(P<0.05);饲粮中添加1.5 g/kg的CPP组较对照组PMCA的相对表达量上调(P<0.05),添加水平的提高对PMCA的相对表达量呈线性增加(P<0.05);饲粮中添加0.5 g/kg的CPP组CA的相对表达量高于对照组(P<0.05),随着CPP添加水平的提高,CA的相对表达量呈线性降低(P<0.05)。(9)与对照组相比,饲粮中添加不同水平的CPP组下调了蛋壳腺中CA的相对表达量(P<0.05);饲粮中添加2.0 g/kg的CPP组ALP的相对表达量高于对照组(P<0.05),且随着CPP添加水平的升高,ALP的相对表达量呈现线性和二次关系(P<0.05);饲粮中添加 CPP对OPN和CaBP-D28K的相对表达量无显著影响(P>0.05)。(10)饲粮中添加CPP对产蛋后期蛋鸡的卵泡数量、肝脏抗氧化功能和肠道组织形态无显著影响(P>0.05)。饲粮中添加CPP对胫骨重量、粗灰分及Ca、P含量无显著影响(P>0.05)。饲粮中添加1.0 g/kg的CPP组胫骨强度高于对照组(P<0.05)。结论:在本试验条件下,饲粮中添加0.5~1.0 g/kg CPP提高了海兰褐蛋鸡肠道和蛋壳腺中相关酶活,进而促进血清钙含量与胫骨强度,提高了蛋品质。
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