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农产品质量安全问题关乎国民健康和社会稳定。农药的不合理使用对环境甚至是人类健康造成很大威胁,为了满足农药残留标准的要求,需要建立一种高灵敏度、高准确性的检测方法。生物条形码免疫分析方法依据抗体识别抗原,基于胶体金和核苷酸链信号放大技术、磁性纳米粒子分离技术的特性来实现对农药的检测。微滴式数字PCR（ddPCR）作为一种绝对定量检测技术被广泛应用于医学、转基因检测、微生物检测等领域,还没有关于ddPCR检测农药的报道,本研究将免疫竞争反应解离下来的生物条形码DNA链在ddPCR上进行定量检测。主要研究内容与结果为:制备胶体金纳米探针和磁性纳米探针,设计了一组特异性很高的PCR扩增所需的DNA模板、上下游引物和探针,并优化了PCR扩增时的退火温度,上下游引物浓度和探针浓度。对胶体金纳米探针和磁性纳米探针的工作浓度、甲醇含量进行了优化。在最优条件下建立标曲,其三唑磷的检出限(IC10)分别为0.002 ng mL–1,IC50的值为0.197 ng mL–1。线性检测范围为0.01-20 ng mL–1。对苹果、黄瓜、卷心菜和大米四种基质进行了添加回收实验。该方法的平均回收率在76.9-94.4%之间,相对标准偏差（RSD）在10.8-19.9%之间。该方法在苹果、黄瓜、卷心菜和大米四种样品基质中的回收浓度与LC-MS/MS在四种样品基质的回收浓度做相关性实验,发现线性良好,也证明了基于ddPCR的生物条形码免疫分析方法的可靠性,可以用于农产品中三唑磷农药残留的限量检测。建立了基于ddPCR的生物条形码免疫分析方法同时检测三唑磷,对硫磷和毒死蜱三种农药,本章设计了另外两组DNA链、上下游引物和探针。优化了这两组序列PCR扩增的退火温度、上下游引物和探针浓度。优化了需要加入对硫磷和毒死蜱抗体的含量和DNA的含量。做了关于三种抗体之间特异性的实验,发现特异性较好。对抗原和抗体的工作浓度进行了优化。在最优条件下建立标曲,其三唑磷、对硫磷和毒死蜱的检出限(IC10)分别为0.22 ng mL-1,0.45 ng mL-1和4.49 ng mL-1。对苹果、黄瓜、卷心菜和梨基质进行了添加回收实验。该方法的平均回收率在75.5–98.9%之间,RSD在8.3–16.7%之间。该方法在梨中的回收浓度与LC-MS/MS在梨基质的回收浓度做相关性实验,发现线性良好,证明了基于ddPCR的生物条形码免疫分析方法的准确可靠性。本研究建立的基于微滴式数字PCR的生物条形码免疫分析方法能够同时检测三唑磷、对硫磷和毒死蜱。也为实现高通量的检测更多种农药奠定了基础。