同步筛检三种残留药物的快速检测方法的探索性研究

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药物残留一直是食品安全领域的热点问题,不同种类不同程度的残留药物可通过环境和食物链对机体产生多种直接和间接危害。而实际检测方法中的样品单一性、操作的繁琐性和设备与成本的昂贵性等缺点,使得对能广谱特异、低耗高效和灵敏便捷地同步筛检方法的需要显得尤为迫切。基于此,本研究开展的主要目的为最终利用一种融合抗体同时与相关的三种残留药物发生免疫学反应,所建立的方法也能同时筛检三种药物。本实验具体分为一个基础和两个研究展开方向。基础为氯霉素和磺胺二甲嘧啶(CAP和SM2)单克隆抗体的制备,并对纯化的抗体进行六个方面的特性鉴定。首先,从分子水平探讨,分别克隆、组装、串联和表达了CAP、SM2和环丙沙星(CPFX)单链抗体及串联后的融合抗体,并对单链抗体的二级结构进行预测。然后,从免疫学角度出发,利用CAP和SM2纯化后的单克隆抗体,分别建立直接和间接竞争ELISA方法,获得标准曲线后比较两类检测方法,对同一样品实样检测均具有较好的相关性;同时利用胶体金试纸初步组装了氯霉素金标检测试纸。利用建立的优化ELISA条件分别检测纯化后的三种单链抗体和融合抗体,并平行比较相对应的单克隆抗体、单链抗体和融合抗体。结果显示:利用融合单链抗体同步筛检三种药物的方式可行。
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