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整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)是一种新发现的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在多种恶性肿瘤中高表达,抑制ILK的活性能够导致细胞周期的停滞和细胞凋亡的启动。转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为,近几年研究发现,生长因子的细胞内信号转导通路同肿瘤转移密切相关,其中磷脂酰肌醇-3-羟基激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)信号转导通路在肿瘤转移中扮演了重要的角色。近年来研究表明,ILK活性有赖于PI3K的活化,PI3K的作用可被特异性抑制剂完全阻断,进而影响ILK的激活,使其对下游信号分子磷酸化作用受抑,最终引起细胞信号传导通路受阻,影响了肿瘤的侵袭转移。国内目前关于ILK在卵巢癌的表达及其在卵巢癌侵袭转移中的作用尚未见报道。我们设想ILK可能与卵巢癌的发生进展及侵袭转移相关,抑制ILK的活性有可能抑制卵巢肿瘤的侵袭,使其成为卵巢肿瘤基因治疗的理想靶点。目的:1、探讨整合素连接激酶(ILK)在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义。2、研究PI3K/AKT传导通路的特异性抑制剂LY294002对卵巢上皮癌细胞株HO8910PM和HO8910中ILK的表达水平及对癌细胞侵袭能力的抑制作用,初步探讨可能的作用机制。方法:1、采用免疫组化sp法检测卵巢上皮性肿瘤组织中整合素连接激酶的表达。2、免疫细胞化学法和Western Blot检测用LY294002处理前后,HO8910PM和HO8910细胞株中ILK蛋白表达水平的变化。3、RT-PCR方法测定LY294002处理前后,HO8910PM和HO8910细胞株中ILK mRNA的水平变化。4、MTT法检测LY294002对肿瘤细胞生长的影响。5、细胞-基质粘附试验检测LY294002作用前后,肿瘤细胞粘附能力的改变。6、Transwell小室法观察LY294002作用前后,HO8910PM和HO8910细胞侵袭能力的变化。结果:1、ILK在恶性肿瘤中的表达明显高于良性肿瘤和交界性肿瘤(P<0.05);在卵巢癌中的表达临床Ⅰ～Ⅱ期均明显低于Ⅲ～Ⅳ期,(P<0.05),高中分化、无淋巴结转移组均显著低于低分化及有淋巴结转移组(P<0.05)。2、LY294002可以显著抑制ILK蛋白在HO8910PM和HO8910细胞株中的表达(P<0.05),其抑制效果在一定作用时间内与LY294002呈现浓度依赖性关系,随着LY294002的浓度增加,表达水平逐渐下降。ILK蛋白在HO8910PM中比在HO8910中表达水平增高,LY294002对HO8910PM的作用更为明显。3、LY294002可以显著抑制ILK mRNA在HO8910PM和HO8910细胞株中的表达(P<0.05),随LY294002浓度增加,ILK mRNA表达水平逐渐下降。4、LY294002能明显抑制HO8910PM组与HO8910组细胞的生长。5、LY294002增强细胞与基质的粘附能力,其作用有显著性差异(P<0.05)。6、处理组与对照组相比,穿过微孔滤膜的细胞数明显减少,有显著性差异(P<0.05)。HO8910PM组与HO8910组相比,细胞侵袭能力明显增强(P<0.05)。结论:1、ILK参与肿瘤的侵袭转移过程,在卵巢癌的恶性进展中起重要作用,可以作为细胞转移的新的生物学标记。2、ILK高表达的肿瘤细胞对基底膜的粘附减弱,侵袭转移能力增强,这可能是通过PI3K/AKT信号转导途径激活而发挥作用。3、特异性抑制剂LY294002能抑制ILK的表达,从而起到抑制肿瘤细胞侵袭、促进粘附的作用,且其抑制作用随作用浓度的增大而明显增加。