MnFe2O4纳米簇的合成、修饰及在免疫层析检测D-二聚体中的应用

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尺寸均一、高饱和磁化强度的MnFe2O4纳米材料因为其在磁共振成像、生物大分子分离、磁热疗和免疫层析检测等方面有广泛的应用而成为材料领域研究的热点之一。本论文中,在氩气氛围保护下,以Fe(acac)3与Mn(acac)2为前驱体,通过高温热分解法可控制备了分散性良好、高饱和磁化强度的超顺磁油相MnFe2O4纳米簇,其饱和磁化强度高达85 emu/g。通过配体交换法,用3,4-二羟基氢化肉桂酸(DHCA)分子对纳米颗粒表面进行修饰,获得在水中和缓冲液中分散良好的纳米簇。所得纳米簇的表面富含羧基官能团,为之后的生物应用奠下基础。将制备的MnFe2O4纳米簇微粒作为生物标记物,建立免疫层析法(LFIA),用于快速定量检测D-二聚体(D-D),检测的浓度范围为0.05-6 ug/ml,具体研究结果如下:(1)油相MnFe2O4纳米簇颗粒的制备采用高温热分解的方法,以乙酰丙酮铁和乙酰丙酮锰为前驱体,十八烯作反应溶剂,在油酸存在的条件下,通过调节前驱体的浓度制备了不同尺寸和形貌的MnFe2O4磁性纳米颗粒。并通过扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、X-射线粉末衍射(XRD)、傅里叶红外光谱仪(FTIR)、热重分析(TGA)及振动样品磁强计(VSM)等方法对MnFe2O4磁性纳米颗粒及纳米簇进行了表征。TEM结果表明合成的MnFe2O4纳米簇粒径为47.3纳米,是由粒径为8.2纳米的颗粒组成的。VSM结果显示其饱和磁化强度为85 emu/g。(2)油相MnFe2O4纳米簇的水相转移采用DHCA配体交换法,对油相MnFe2O4纳米簇进行水相转移和羧基修饰。以四氢呋喃作为反应溶剂,成功将油相的MnFe2O4纳米簇粒子转入水相,并且粒子表面富含羧酸离子。傅里叶红外光谱特征峰表明粒子被成功转水及修饰。(3)MnFe2O4纳米簇在免疫磁层析法定量检测D-二聚体中的应用研究选择MnFe2O4纳米材料作为免疫磁层析的载体,首先制备不同孔径NC膜的层析试纸条,进行试纸条NC膜的优化与选择。然后通过双抗体夹心法,建立MnFe2O4纳米颗粒作为载体的免疫磁层析检测方法,实现了对血清中D-二聚体的定性和定量检测。实验结果表明,高饱和磁化强度的MnFe2O4纳米簇可以很好地应用于免疫磁层析系统。我们通过绘制测试线和对照线(T/C)的磁信号值与D-二聚体浓度的比率来绘制标准曲线,并且使用对数函数方程来获得拟合参数,相关系数为R2=0.9926,表明定量评估的可行性。特异性实验表明血液中其他的干扰物对D-D二聚体的检测没有显著影响。
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