弧菌(vibrio)是海洋环境中最常见的细菌类群之一,广泛分布于近岸、河口海区的海水和生物体中,其致病性受宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素的影响较大,是海水养殖动物的主要病原菌之一。危害的对象包括鱼类、甲壳类和贝类动物,给我国的海水养殖事业带来了很大的损失。预防与控制海水养殖动物弧菌病的发生,加强弧菌病的研究,对海水养殖业可持续发展具有重要的意义。文蛤(Meretrix meretrix Linnaeus)是我国沿海常见的一种重要经济贝类,是出口创汇的重要水产品之一。近年来,随着养殖规模的扩大,由于养殖水域水质环境恶化和各种疾病的流行而引发的养殖文蛤的大规模死亡已造成巨大的经济损失,因此,预防与控制养殖文蛤病害的发生,加强文蛤疾病的研究,已经成为保障文蛤养殖业健康发展的当务之急。本实验从患病文蛤体内分离出一优势菌株WT01,回归感染试验证明是文蛤的致病菌,对该菌形态、生理生化特征、盐度、温度和pH值生长条件以及16S rRNA基因序列进行了研究。结果表明,该菌为革兰氏阴性菌,发酵葡萄糖产酸不产气,氧化酶阳性,生长需NaCl,无色素,不发光,在TCBS平板上形成圆形黄色菌落,对弧菌抑制剂O/129敏感,具有弧菌属的典型特征。16S rRNA基因序列分析表明,该菌与需钠弧菌(Vibrio natriegen)的亲缘关系最为接近,其同源性达99%以上,因此将该菌鉴定为需钠弧菌,病原菌对文蛤的半数致死量为5.5×106CFU/mL,在温度10℃-42℃、PH值5-11、盐度5‰-80‰的环境条件下都能生长。药敏试验结果表明,该菌对氟哌酸、复方新诺明、菌必治、先锋必、链霉素、氯霉素、庆大霉素等抗生素较为敏感。微生态制剂(microecologics)具有防治疾病、促进生长、增加体重等多种功能,且无污染、无残留、不产生抗药性。不仅可以改善养殖水域环境,还可以提高养殖对象的机体免疫力,减少病害的发生,因此具有广泛的应用前景。本研究在实验生态条件下,观察浓度分别为1×105cfu/L、1×106cfu/L和1×107cfu/L的微生态制剂(主要成分为芽孢杆菌)对文蛤暴露后第1d、3d、7d、21d、28d和恢复14d后对文蛤消化腺中的抗菌活力、溶菌活力、超氧化物歧化酶活力(SOD活力)和过氧化氢酶活力(CAT活力)的影响,确定微生态制剂对文蛤非特异性免疫力的影响;用需钠弧菌对诱导28d后的文蛤进行攻毒实验,测定相对免疫保护率,以确定微生态制剂对文蛤抗病力的影响。结果表明,各浓度组的微生态制剂均能显著提高文蛤非特异性免疫因子的活力,对消化腺抗菌活力和SOD活力的促进作用尤为显著,且不同浓度试验组之间的免疫因子活力也有显著差异。与对照组相比,溶菌活力和CAT活力在第7d就出现显著性增高,抗菌活力和SOD活力在第14d与对照组出现显著性差异;恢复14d后,溶菌活力和SOD活力恢复到对照组相当的水平,抗菌活力和CAT活力仍明显高于对照组。攻毒试验结果显示,试验组的免疫保护率分别达到22.2%、27.8%和44.4%。表明所用微生态制剂可以促进文蛤的非特异性免疫功能。通过对水质的测定,证实使用微生态制剂对降低水中的氨氮含量、亚硝酸盐含量和化学耗氧量的效果显著。