基于质谱和光谱技术的鱼类中蛋白的识别及磷酸化蛋白分析

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yh__nn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水产品由于其味道鲜美、营养丰富,有益身体健康,因此广为消费者青睐。我国是水产品生产、加工、消费大国,随着水产市场的逐渐扩大,同时出现了一些对水产品质量的问题重视度不够的问题。因此消费者了解对于水产品的安全性,可追溯性和真实性变得越来越重要。此外,对所检测到的蛋白进行数据库搜索来识别蛋白质,发现一种功能蛋白质——葡萄糖磷酸异构酶,它参与糖酵解作用和肌肉收缩,影响肌肉蛋白质的代谢和磷酸化修饰。磷酸化修饰是生物体中普遍存在和最为重要的一类蛋白质修饰。这种翻译后修饰会影响蛋白质的结构和作用:在结合、催化、调节功能等方面都被赋予新的功能。因此近年来对它的研究也是一个热衷的方向,同时磷酸化蛋白的水平是影响鱼类肌肉质量的关键因素,本文也对磷酸化水平测量方法和应用做了一定的研究,可能对鱼类储藏时间的评估提出了一个新的指标。在本文中,基于高通量基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI TOF MS)技术,利用MALDI靶标板直接分析鱼皮上和肌肉横切面的分子印迹生物活性物质,对所获得的质谱图进行多元分析,并在95%的置信区间水平上得到不同鱼类的主成分分析(PCA)的得分情况。该方法能够对鱼类进行分类和鉴定,并通过不同部位的比较还简化了取样的部位,表明该方法具有良好的分析能力和重现性。通过对鱼皮样品和鱼肌横切面样品分析能够对鱼类实现快速高效无损的区分分类,有望应用于其它水产品的认证,拓宽了用于无损检测的方法。对于磷酸化蛋白水平的检测方法,本文建立了一种基于三价铁离子和紫外-可见光谱对磷酸化蛋白测量方法。因铁离子会与磷酸化肽发生螯合作用,使得磷酸化肽的光吸收能力变大,引起吸光度的吸收增益。因此在Fe3+的探针辅助下可有效区分磷酸肽和非磷酸肽,证明了其对磷酸肽和非磷酸肽的超强分辨能力。通过分析吸光度变化大小可以判断磷酸化强度的高低。另外,该方法应用于牛奶和鱼肌肉的实际样品中磷酸化蛋白水平的测量,证明了牛奶中脂肪等其它组分没有不会对该方法的测量造成结果的影响。针对磷酸化蛋白水平的分析提出了一种新的基于光谱技术的分析方法,有希望对于肌肉储存时间做出预判。
其他文献
目的:本研究课题针对蝶蛎左金汤治疗肝胃郁热型反流性食管炎的临床效果,对蝶蛎左金汤治疗该病的临床疗效分析并评价,为今后本病的临床诊疗提供新的借鉴。方法:根据纳入标准,将患者随机分成治疗组与对照组,各30例。对照组服用泮托拉唑钠肠溶片,治疗组服用蝶蛎左金汤联合泮托拉唑钠肠溶片,疗程8周。对所有患者治疗始末的中医临床症状积分、胃镜下分级及RDQ量表积分进行统计,并于治疗结束后的4周,对组内治疗有效患者随
学位
随着社会发展与进步,水生态环境越来越受到人们的高度重视。水是人类赖以生存的重要资源,水资源短缺和水环境污染问题越来越受到人们关注。而随着社会经济的快速发展,我国人工湿地处理污水技术发展迅猛,城镇污水的处理效率有了进一步提高,但对人工湿地处理含盐污水问题还缺乏深入系统的研究。本论文以微生物脱盐燃料电池强化型人工湿地为研究对象,研究了复合型人工湿地的构建与启动,设计了多个实验条件验证复合系统对含盐污水
学位
自我国改革开放以来,城镇化的进程在不断的加快。除在家务农外,农民有了进城务工的新选择,因此,大批的农民进城务工,由此产生了农村留守人口问题。一直以来,农村留守问题产生的对象主要是农村留守妇女、儿童和老人等弱势群体,但进入新世纪,特别是近十年来,原本在城市务工的农村男性中有相当数量的人返回农村,而原本留守在农村的妇女纷纷进城务工,改变了几千年来中国男人在外打拼,女人照顾家庭的传统。越来越多数量的农村
学位
目的:通过观察芪参通窍方治疗腺样体肥大(肺脾气虚型)的临床疗效,探索中医药辨治小儿腺样体肥大的新思路。方法:将纳入研究的60例患儿随机分为治疗组与对照组,治疗组给予芪参通窍方口服治疗,对照组予孟鲁司特钠咀嚼片口服联合糠酸莫米松鼻喷雾剂喷鼻治疗,两组均治疗1个月,记录两组患儿治疗前后主症积分、次症积分、腺样体体积(A/N值)积分,随访1个月记录复发例数,最终进行统计学分析比较两组综合疗效。结果:治疗
学位
目的:本研究观察八珍汤加减联合多巴胺治疗颈动脉支架置入术后持续性颈动脉窦反应的临床疗效,探讨八珍汤加减联合多巴胺治疗本病的可行性。方法:纳入符合入组标准的患者60例,随机分入观察组和对照组。对照组用多巴胺注射液静脉泵入治疗,观察组在对照组治疗方法的基础上口服八珍汤加减。对比治疗前后两组患者的收缩压、中医证候积分、NIHSS评分、Mo CA评分,同时将血常规、肝肾功能作为安全性指标,评价八珍汤加减联
学位
试验一:三丁酸甘油酯对草鱼生长、饲料利用、血清生化指标、肠道组织和微生物的影响为研究三丁酸甘油酯对草鱼生长、饲料利用、血清生化指标、肠道组织和微生物的影响。在基础饲料中分别添加0(对照组)、200、400、600、800 mg/kg的三丁酸甘油酯(记为TB-0、TB-200、TB-400、TB-600、TB-800;采用有效含量为25%的微囊三丁酸甘油酯,添加量均指有效含量),饲养平均体重为(17
学位
赤潮是一种常见的海洋生态异常现象,严重影响着沿岸的生态和经济环境,引起了全球性的关注。赤潮分布具有明显的区域性,长江口以及东海沿岸是赤潮频发的地区之一。为了防治赤潮灾害,人们尝试监测完整的赤潮生消过程,从而更好的了解赤潮过程对环境的影响程度,但是赤潮具有突发性、随机性以及持续时间短等特点,因此常规的现场调查难以实现该设想。目前,卫星遥感技术具有成本低廉、覆盖范围广、便于长期监测等优势,被广泛应用于
学位
水产品在贮藏过程中极易发生水分流失和蛋白质、脂质的氧化降解,导致其新鲜程度下降、鱼肉腐败变质。传统的石油基塑料包装薄膜已带来了严重的“白色污染”问题,并且无抗菌、抗氧化等功能,在实际应用中不能较好地满足水产品的保鲜需求,因此本课题拟将具有广谱抗菌性和抗氧化活性的柠檬草精油应用于活性包装,通过缓释作用使其缓慢释放到鱼体表面,达到长效保鲜的功效。本文主要研究了将β-环糊精(β-Cyclodextrin
学位
随着国民经济总产值的增加,人们的生活条件等各方面都发生了巨大变化,在经济总量持续增加的同时,全球变暖、臭氧层破坏等问题日益突出,为了保护人类共同的绿色家园,经济发展必须与环保同步进行。科学技术是引领世界各国可持续发展的动力,许多环境问题的解决也必须依靠科学技术的提高与创新。在我国,为了解决北方冬季雾霾天气,北方许多省份相继发布公告,陆续开展“煤改电”、“煤改油”等一系列举措,旨在保护大气环境,共建
学位
滴水湖开挖于尚未成陆海滩,是我国规模最大的城市人工湖。目前已形成湖区为中心,通过“七射、三涟”等人工河道与周边联系形成网状水系格局。滴水湖及入湖河道作为上海浦东新区南汇新城的城市核心,具有城市景观生态、旅游观光、防洪调水等综合功能。滴水湖的水源为黄浦江支流大治河,经引水河道入湖,引水水源水质较差,导致引入滴水湖后,湖区内水质下降。随着临港新城社会经济的快速发展及城市化脚步的加快,该区域土地利用结构
学位