【摘 要】
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目的观察长期服用NSAIDs患者小肠上皮细胞绒毛、紧密连接及超微结构改变;阐明肠上皮细胞nc Ru PAR及PAR-2的表达水平以及云母的干预机制。方法1.收集长期服用NSAIDs患者及健康志愿者小肠组织标本,透射电子显微镜对比观察小肠上皮细胞绒毛、紧密连接及超微结构。2.培养Caco-2细胞,分为以下四组:A组:空白对照组;B组:双氯芬酸钠处理组;C组:双氯芬酸钠处理+云母含药血清组;D组:双氯
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目的观察长期服用NSAIDs患者小肠上皮细胞绒毛、紧密连接及超微结构改变;阐明肠上皮细胞nc Ru PAR及PAR-2的表达水平以及云母的干预机制。方法1.收集长期服用NSAIDs患者及健康志愿者小肠组织标本,透射电子显微镜对比观察小肠上皮细胞绒毛、紧密连接及超微结构。2.培养Caco-2细胞,分为以下四组:A组:空白对照组;B组:双氯芬酸钠处理组;C组:双氯芬酸钠处理+云母含药血清组;D组:双氯芬酸钠处理+PAR-2阻断剂FSLLRY-NH2组。Transwell检测肠上皮细胞通透性改变,Western-blot检测细胞PAR-2、Occludin、Claudin-1蛋白表达水平,q RT-PCR检测细胞nc Ru PAR及PAR-2 m RNA表达水平。结果1.长期服用NSAIDs患者小肠组织电镜下观察发现:小肠上皮细胞绒毛变短,杂乱倒伏,部分缺失;紧密连接增宽,桥粒减少;线粒体正常结构消失,嵴结构紊乱、消失,部分线粒体呈空泡状。2.双氯芬酸钠处理后Caco-2细胞通透性增高,Occludin、Claudin-1蛋白表达降低,nc Ru PAR及PAR-2表达增加;云母含药血清和PAR-2阻断剂FSLLRY-NH2抑制双氯芬酸钠所致肠上皮细胞通透性的增加,同时抑制其对nc Ru PAR、PAR-2、Occludin及Claudin-1表达的影响。结论长期服用NSAIDs可致小肠上皮细胞绒毛受损,紧密连接增宽,桥粒减少,线粒体正常结构消失。双氯芬酸钠处理后Caco-2细胞nc Ru PAR及PAR-2表达上调,细胞通透性增加,紧密连接受损,肠黏膜机械屏障功能损伤。云母可能通过靶向干预nc Ru PAR,降低PAR-2表达,从而起到保护NSAIDs相关性小肠损伤肠黏膜机械屏障功能的作用。
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