与传统的肿瘤活检相比,液体活检（Liquid Biopsy）被认为是一种更实用的实时、无创的诊断、监测癌症的方法。其本质上是对疾病进行动态监测,可根据患者对治疗的反应来对肿瘤标志物进行重复采样以调整治疗,也称为个性化或精准医疗。液体活检标志物包括循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells,CTCs）、循环肿瘤DNA（Circulating Tumor DNA,ctDNA）和外泌体（Exosomes）。本课题以CTCs和外泌体为研究对象,一方面,在优化和完善前期工作即人外周血CD3⁺CD4⁺T细胞分选方法基础上,对花瓣型Fe₃O₄/Au纳米复合微粒（Flower-like Magnatic Nanoparticals,FMNPs）的功能化程度、关键反应缓冲液和封闭剂等条件进行优化,进一步建立了人外周血CD45⁺细胞分离富集方法,为后续CTCs的阴性富集奠定了实验基础。除了评估纯度、回收率、细胞活性、细胞凋亡等传统指标,引入碎片率这一新指标以验证红细胞、血小板等“碎片”物质对靶细胞分离的干扰程度;另一方面,使用微米级磁性复合微粒,通过系统优化实验条件,分别建立了细胞系来源、血浆来源外泌体的分离方法,并依据Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018（MISEV2018）国际准则对分离产物进行了系统鉴定。实验结果表明,分离体系优化后,CD3⁺CD4⁺T细胞分离后纯度由（83.03±1.22）%增加至（98.38±0.61）%,回收率由（92.07±1.29）%增加至（98.50±1.35）%,碎片率由（23.73±2.41）%下降至（6.18%±1.29）%。优化后的纯度、回收率、碎片率、细胞活性、凋亡状态均与德国Miltenyi经典MACS分离效果可比。CD45⁺细胞分离体系中,分离后纯度达到（99.68±0.27）%,回收率达（96.16±1.08）%,碎片率为（4.52±0.93）%,再次验证了该体系的可重复性,证实基于花瓣型纳米复合微粒的细胞分选系统的科学性。在外泌体分离方法研究中,结果显示,本课题建立方法可富集细胞系来源外泌体总蛋白为（1.3±0.09）μg/mL、血浆来源外泌体总蛋白为（5±0.12）μg/mL;外泌体特异性膜蛋白CD9、CD81、CD63,胞内蛋白TSG101被验证中在两种来源的分离产物中均存在,而细胞特异性蛋白Calnexin未被检出,其结果与国际公认超速离心法分离结果相同,证明了以微米级磁性复合微粒为基础的免疫磁性分离外泌体方法的特异性。