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舌鳞状细胞癌是临床上最常见的口腔癌,由于舌体独特的组织学特征,即拥有丰富的淋巴循环以及高度肌肉化的结构,使得舌癌较其他类型的口腔癌更容易发生局部侵袭与远处转移,这也是舌癌预后不良的一个重要原因。虽然在舌癌诊疗方面的技术不断发展,但是舌癌的存活率在过去的20年里仅仅提高了5%,而5年生存率仍然保持在60%左右[1]。因此,研究与舌癌生长和转移相关的分子机制以及开发基于这些分子机制的新型治疗方式具有长远而深刻的意义。IL-1β作为一个重要的炎症介质,能够参与多种细胞活动,包括细胞增殖,分化和凋亡[2]。近年来的研究显示,IL-1β在多种肿瘤中发挥着重要的作用,但是在舌癌方面的研究仍较少。因此,本研究想要探索其基因IL1B在舌癌中所发挥的作用及其对舌癌细胞的功能影响。目的探究IL1B基因在舌癌中的表达情况及其对舌癌细胞株生物学功能的影响。方法第一部分:将5例舌癌患者的舌癌组织及其邻近的正常组织进行RNA-seq测序,观察IL1B是否在舌癌组织中差异表达。为了进一步明确测序结果的可靠性,我们将收集得到的58例患者的舌癌组织及其癌旁组织进行qRT-PCR检测IL1B mRNA的表达情况。此外,我们还通过TCGA以及Oncomine数据库分析头颈部鳞癌、口腔鳞癌以及舌癌中IL1B相对于正常组织的表达情况。第二部分:设计合成IL1B的siRNA,转染CAL27以及SCC9舌癌细胞株,运用qRT-PCR技术验证转染siRNA后IL1B在mRNA水平的敲低情况;通过Western blot验证转染siRNA后能否降低两细胞株中IL-1β蛋白的表达;通过ELISA实验来观察在转染siRNA后CAL27细胞分泌到培养基上清液中的IL-1β浓度是否降低,从而筛选出两条干扰有效的siRNA。运用筛选出来的siRNA进行CCK8增殖实验和平板克隆实验研究IL1B敲低后对CAL27和SCC9舌癌细胞株增殖能力的影响。用无包被Matrigel的侵袭小室观察抑制IL1B后舌癌细胞株迁移能力的改变。用包被Matrigel的侵袭小室研究抑制IL1B后舌癌细胞株侵袭能力的影响。结果第一部分:对5例舌癌患者的舌癌组织及其癌旁组织的测序结果显示较之邻近的正常组织,IL1B在舌癌组织中表达量升高;后续运用qRT-PCR对58例舌癌组织进行检测的结果与测序的结果相一致,也显示IL1B在舌癌组织中的表达高于邻近的正常组织;TCGA数据库分析结果显示IL1B在头颈部鳞癌中是异常高表达的,且高表达IL1B可能预示着患者较短的总生存期;Oncomine数据库分析结果显示IL1B在口腔鳞癌和舌癌中的表达量较正常组织是升高的。第二部分:运用IL1B的siRNA转染CAL27和SCC9舌癌细胞后,qRT-PCR和Western blot结果显示siRNA-489和siRNA-853能够能在mRNA和蛋白质水平敲低IL1B,ELISA结果显示转染siRNA后,CAL27细胞分泌到培养基上清液中IL-1β的浓度降低。运用筛选出来的两条有效siRNA进行CCK8增殖实验和平板克隆实验,结果表明IL1B siRNA干扰后,CAL27和SCC9细胞的增殖能力降低。侵袭小室实验结果显示下调IL1B能够抑制CAL27和SCC9细胞的迁移和侵袭能力。结论以上的实验结果表明,IL1B在舌癌组织中是高表达的,在舌癌细胞株中下调IL1B的表达后,能显著地抑制舌癌细胞的增殖、迁移和侵袭的能力,说明IL1B在舌癌中可能起到促癌基因的作用,其在舌癌的生长和转移过程中可能扮演着重要的角色,其中的具体机制值得更为深入的探讨与研究。