【摘 要】
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以盐敏感水稻品种武运粳8号为材料,研究了盐胁迫对其根尖细胞程序性死亡（PCD）的诱导情况,确定了PCD的诱导条件。结果表明:高浓度盐胁迫（500 mmol/LNaCl）后,水稻根尖细胞呈现明显的PCD特征,例如:DNA片段化,细胞核浓缩变形以及TUNEL阳性反应。这些细胞核事件从处理4 h后开始出现,随着时间延长,更加明显。此外,盐胁迫处理还能引起细胞色素c（Cytc）从线粒体释放到细胞质,该现象
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以盐敏感水稻品种武运粳8号为材料,研究了盐胁迫对其根尖细胞程序性死亡（PCD）的诱导情况,确定了PCD的诱导条件。结果表明:高浓度盐胁迫（500 mmol/LNaCl）后,水稻根尖细胞呈现明显的PCD特征,例如:DNA片段化,细胞核浓缩变形以及TUNEL阳性反应。这些细胞核事件从处理4 h后开始出现,随着时间延长,更加明显。此外,盐胁迫处理还能引起细胞色素c（Cytc）从线粒体释放到细胞质,该现象在胁迫处理2h即被观察到,早于上述细胞核事件。以上述实验体系为模型,研究了PCD对细胞质,细胞核中核酸酶活性的诱导情况,以及PCD相关核酸酶的性质分析。核酸酶活性电泳结果表明:500mmolNaCl处理水稻根尖2h后,细胞质,细胞核组分中都有新的核酸酶活性条带出现,根据其亚细胞定位和分子量分别命名为OsCyt20,OsNuc37。药理学研究发现,细胞质PCD相关核酸酶OsCyt20为Ca2+/Mg2+依赖型,最适pH在7.0,Zn2+、EDTA对其活性都有强烈抑制作用。体外酶切实验表明,包括OsCyt20在内的细胞质核酸酶都不能导致细胞核染色体DNA发生特异性切割形成DNA Ladder。细胞核PCD相关核酸酶OsNuc37为Zn2+依赖型,最适pH在4.5—6.0,EDTA对其活性有强烈抑制作用。糖结合试验证明OsNuc37是一个糖蛋白。体外酶切实验表明,OsNuc37能够导致细胞核染色体DNA发生特异性切割,形成DNA Ladder。综合上述研究结果,本文鉴定了一个新的细胞程序性死亡相关核酸内切酶OsNuc37。在盐胁迫诱导水稻根尖细胞PCD过程中,OsNuc37负责细胞核染色体DNA的降解。本文的研究结果为进一步揭示植物细胞PCD的分子机制提供了依据。
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