犬瘟热(canine Distemper，CD)是由犬瘟热病毒(CDV)引起的一种高度接触性传染性疾病。目前对预防该病依赖弱毒疫苗的使用。但是现有弱毒疫苗的保护率不尽如人意。DNA疫苗等新型疫苗是发展的趋势。 CDV是负链单股不分节段的RNA病毒。附着或血凝蛋白(H)其表面蛋白之 一，是病毒的保护性抗原，能够激发针对CDV的保护性免疫。 为了探讨利用基因疫苗进行CD预防的可能性，本实验用已构建好的犬瘟热NJ-15株H基因的真核表达质粒肌肉注射免疫小鼠，用市售的弱毒疫苗免疫作阳性对照，以pcDNA3.1／zeo(+)原质粒为阴性对照。每个免疫组12只清洁级昆明小鼠。免疫两次，中间间隔2 week。质粒免疫鼠抗体水平的ELISA效价峰值达到2<-11>，并且持续了长达24 d，弱毒苗对照组抗体峰值达到2<-14>，但达到峰值后迅速下降。IgG亚类检测中质粒免疫组IgG2α／IgG1达1.9／1，呈现明显的Th1型免疫偏向。而弱毒免疫组IgG2α与IgG1效价没有明显差异。中和试验中质粒免疫组的血清能够有效阻止病毒在Vero细胞上产生病变，中和效价达1／16，略低于弱毒免疫组血清的1／64。淋巴细胞转化试验中质粒免疫组刺激指数为9.9，免疫鼠的淋巴细胞具有较高的刺激转化活性，弱毒免疫组刺激指数为15.1。以上结果说明此真核表达质粒能够有效地激发小鼠的体液免疫和细胞免疫，可以作为犬瘟热防疫的一个候选方法。 CD目前的特异性诊断主要为PCR和荧光抗体。这种方法对仪器有着较高的要求，不易于在临床上推广。利用单克隆抗体建立检测方法简便易行。本实验利用已证明能激发小鼠产生针对CDV特异性免疫的真核表达质粒免疫BLB／c小鼠制作单克隆抗体。利用全病毒包被ELISA板用间接ELISA法筛选抗体阳性克隆，用有限稀释法进行亚克隆。筛出一株单抗株，双夹心ELISA法证明其与保存的四株犬瘟热病毒株都可以反应，而与对犬致病的其他主要四种病毒包括犬细小病毒(CPV)GN株、犬腺病毒(CAV)Manhattan LPV3株、犬副流感(PLV)Cornell株、犬冠状病毒(CCV)KM株没有交叉反应没有交叉反应。该株单抗将有可能用于建立CDV的ELISA检测方法。