十字花科黑腐病菌hrp基因簇左侧序列基因的功能鉴定和表达调控分析

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lioutao2009
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许多植物和动物病原菌利用Ⅲ型分泌系统(T3SS)运送毒力蛋白至寄主细胞中。植物病原菌的T3SS由hrp(hypersensitive response and pathogenicity genes)基因编码。hrp基因和其它一些致病相关基因共同存在于一个致病岛的结构中,即Hrp致病岛。十字花科黑腐病菌Xcc8004(Xanthomonas campestris pv.campestris str.8004)有一个长41.7-kb的Hrp致病岛,包含41个开放阅读框(ORF)。该致病岛是一个典型的三元结构:位于致病岛中心区的hrp基因簇、左侧翼的假定基因区段(HGR)和右侧翼的降解酶类基因区段(EGR)。HGR长7.4-kb,注释蛋白编码基因6个,全部为功能未知的假定基因。   本研究以Xcc8004 hrp基因簇左侧的十个基因为研究对象,利用AvrBs1这一报告系统,对其是否为Ⅲ型效应物进行了鉴定,结果发现了一个新的效应物基因XC2994。利用GUS报告系统,发现XC2994是一个受hrpG及hrpX正调控的基因,同时也发现XC2987、XC2989、XC2990、XC2998也受hrpG及hrpX正调控。RT-PCR结果显示,除XC2988以外,其它基因都受到hrpG及hrpX正调控。致病性检测结果表明,XC2994是一个致病性相关基因,而其它表型没有变化,其致病机制有待研究。XC2988、XC2990、XC2991、XC2998的突变体的致病力下降:XC2988的突变体影响胞外蛋白酶;XC2990、XC2991、XC2998的突变体影响细胞游动性;XC2991、XC2998还影响胞外多糖的产生。本研究还利用农杆菌介导瞬时表达系统,在20种十字花科植物上检测了XC2994是否为一个无毒基因。虽然没有直接证明XC2994是无毒基因,但发现了两个Xcc8004不致病的植物品种,为以后鉴定其它无毒基因奠定了基础。在此之前,本实验室在hrp基因簇左侧还发现了一个效应物基因XC2995,结合本实验结果,表明hrp基因簇左侧可能是一个效应物聚集区。XC2994、XC2995的G+C含量仅为56.9%及49.1%,明显低于基因组的平均G+C含量,显示了基因水平转移的特性。
其他文献
摘要:预设体现对文本的尊重,生成体现對学生的尊重;预设体现教学的计划性和封闭性,生成体现教学的动态性和开放性,两者具有互补性。教学既要重视知识学习的逻辑和效率,又要注重生命体验的过程和质量,但是生成对教学目标的达成有利亦也弊。所以,我们的课堂教学实际上总是在努力追寻着预设与生成之间的一种动态平衡。为此,要认真处理预设与生成的关系,使两者相辅相成、相互促进。  关键词:预设;生成;教师;学生  中图