鬼臼甘草配伍有效成分提取及分离纯化研究

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小檗科八角莲属植物鬼臼具有良好的抗肿瘤活性,木脂素类是其主要抗肿瘤药效部位。本论文以鬼臼甘草提取物为研究对象,优化了回流提取工艺,研究了大孔吸附树脂分离纯化鬼臼毒素的工艺,并对其进行了HPLC-MS/MS化学组成分析。主要研究工作如下:1、通过单因素试验、CCD设计响应曲面法对鬼臼甘草配伍的回流提取工艺进行了优化,确定了其最优提取工艺条件为:乙醇浓度70%,液料比10:1,甘草鬼臼的质量比11.5:1,100℃水浴中提取3h。在最优工艺条件下,可得鬼臼毒素的平均提取率为62.62mg/g(生药材)。2、通过静态吸附与解吸试验,筛选出LSA40大孔树脂用于鬼臼甘草提取液的分离纯化。LSA40树脂在25℃下的吸附等温曲线符合Freundlich方程;其对鬼臼毒素的静态吸附规律符合准二阶动力学方程;用固定床模型对LSA40树脂的动态吸附过程进行模拟分析。LSA40树脂等度洗脱最优工艺条件为:洗脱液为5BV的90%乙醇、上样流速为2BV/h、洗脱流速为4BV/h、上样液浓度为不经稀释的提取液,上样量3BV,在此条件下对洗脱液进行富集,与纯化前相比,鬼臼毒素在总固形物中的含量由0.81%升至2.85%,回收率为59.10%。梯度洗脱工艺的研究结果为:吸附完成后的LSA40树脂先用5BV水洗,然后依次用1BV的10%、30%、50%乙醇溶液淋洗,最后用5BV的90%乙醇以4BV/h进行洗脱,收集90%乙醇洗脱液。经过梯度最优工艺纯化后,鬼臼毒素的百分含量增至2.96%,回收率有所下降,变为48.33%。3、采用HPLC-MS/MS对提取液进行结构分析,定性出了12种木脂素类和2种黄酮类化合物,另发现了一种八角莲醇的同分异构体。
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