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目的：探讨在感染因素存在下，骨折端局部微环境中高于正常组织的TNF-α、IFN-γ、IL-1β炎细胞因子对体外培养人成骨细胞生长影响及凋亡的作用机制。通过对NO的检测，明确NO在这一机制中的作用。并通过应用iNOS抑制剂，以期达到对临床骨不愈合的治疗提供相关的实验依据和理论基础。方法：于手术中分离剥取人骨膜，用酶消化法培养人成骨细胞，并通过技术改进，获取大量生长良好的第二代人成骨细胞。分为对照组1组，实验组4组，分别加入第一组TNF-α(5ng／ml)、IFN-γ(10ng／ml)、IL-1β(10ng／ml)，第二组TNF-α(10ng／ml)、IFN-γ(20ng／ml)、IL-1β(20ng／ml)，第三组TNF-α(15ng／ml)、IFN-γ(30ng／ml)、IL-1β(30ng／ml)，第四组除加入第三组细胞因子剂量，再加入N~G—甲基—左旋精氨酸(L-NMMA)(40ng／ml)。检测时每一项目每组随机取8孔。通过细胞计数，流式细胞仪检测DNA周期及凋亡细胞含量，透射山1穿医科大学硕士学位论文电子显微镜观察超微结构的变化，细胞培养上清液中AK卫、OCN及0N00一含量的变化。综合反映炎性细胞因子对成骨细胞的作用。结果:1.细胞计数:实验1)、2)、3)组数量明显少于对照组，第4)组与对照组比较，差异无显著性。2.流式细胞仪检测:实验1)、2)、3)组S期含量明显较对照组低，凋亡体实验1)、2)、3)组较对照组增高。3.电镜观察可见实验1)、2)、3)组线粒体减少，粗面内质网减少，凋亡细胞增多。4.上清液中AKP、OCN实验1)、2)、3)组减少，而ONOO一明显高于对照组(P<0.01)，且呈时间剂量依赖性。而加入L~NMMA组则可有效抑制炎性细胞因子对成骨细胞的损伤作用。结论:1.感染因素存在下，大量炎细胞因子可能是通过诱导iNOS，使之活性增大，产生大量高于正常组织的NO，造成对成骨细胞的损伤。2.高浓度NO对成骨细胞的损伤呈时间、剂量依赖性。3.诱生型一氧化氮合酶抑制剂可有效缓解炎细胞因子对成骨细胞造成的抑制作用。