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目的:探究骨组织中雌激素受体α(ERα)基因启动子甲基化与肾虚型绝经后骨质疏松症(PMOP)的关系以及补肾中药干预对成骨细胞内ERα基因启动子甲基化、细胞增殖及分化的影响。方法:(1)收集行髋、膝手术的PMOP女性患者20例作为观察组,行髓、膝手术的非PMOP女性患者20例作为对照组。通过问卷调查和体检的方法收集患者的一般资料和体格资料,应用双能X线骨密度分析仪检测患者腰椎2-4骨密度,应用甲基化PCR(MSP)检测患者骨组织中ERα基因启动子甲基化情况。统计学分析观察组与对照组患者骨密度、骨组织中ERα基因启动子甲基化差异及骨密度与ERα基因启动子甲基化程度的相关性。(2)二次酶消化法分离培养大鼠原代成骨细胞,用六味地黄丸和金匮肾气丸分别以10、50、100ng/μL的浓度干预处理。MSP法检测各组细胞内ERα基因启动子甲基化状况,RT-PCR与WB法检测补肾中药干预后ERαmRNA和蛋白表达变化,CCK8试剂盒检测细胞增殖活性,ALP试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)表达,细胞免疫组织化学染色法检测成骨细胞标志物胶原I和骨保护素的表达变化,WB法检测影响成骨细胞增殖分化的信号通路关键分子AMPK和β-catenin的表达变化。结果:(1)与正常对照组患者相比,观察组患者骨密度值降低、骨组织内ERα基因启动子甲基化增加,统计学分析表明,患者骨密度与ERα基因启动子甲基化程度呈现负相关性。(2)补肾中药干预能够抑制成骨细胞内ERα基因启动子甲基化并增加ERαmRNA和蛋白表达,其中,金匮肾气丸的作用更为明显。应用CCK8试剂盒检测细胞增殖结果显示:六味地黄丸干预后,成骨细胞的增殖活性没有明显变化;金匮肾气丸以50、100 ng/μL的浓度干预处理48 h时,能够显著地增加细胞增殖活性。同时,细胞组化检测结果显示:对于成骨细胞早期分化标志物ALP与胶原I的表达,六味地黄丸以100 ng/μL浓度干预时能够增加其表达,金匮肾气丸以50 ng/μL和100 ng/μL浓度干预处理时能够显著增加其表达,且金匮肾气丸促成骨细胞早期分化效果更为明显。此外,WB检测补肾中药干预对影响成骨细胞增殖分化的信号通路关键分子表达变化的结果显示金匮肾气丸干预处理能够降低成骨细胞内p-AMPK蛋白的表达,增加Wnt通路中β-catenin蛋白的表达。结论:患者骨密度值与骨组织内ERα基因启动子甲基化程度呈负相关;补肾中药金匮肾气丸能够显著抑制ERα基因启动子甲基化及增加ERαmRNA和蛋白表达,并通过此途径所介导的AMPK和β-catenin的作用促进成骨细胞的增殖分化。