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我国是世界上最大的白酒生产国,每年都会产生大量的白酒酒糟。其中,一部分酒糟被用于生产饲料,其余多被当成废料丢弃,造成资源的大量浪费。目前为止,利用混菌发酵白酒酒糟制备多酶益生菌饲料的技术正成为饲料行业的研究热点。这不仅可以提高酒糟附加值还可以提升饲料品质。本课题研究对白酒酒糟制备多酶益生菌饲料工艺进行了以下研究。 1.通过人工胃液及猪胆盐耐受实验从实验室中保藏的6株枯草芽孢杆菌中筛选出4株耐受性强的菌种。并在此基础上,进行产酶特性实验,确定3株枯草芽孢杆菌G、Z、Y-5为最终实验菌株。 2.将酒糟作为主要原料辅加玉米、麸皮、豆粕制备发酵底料。以多酶益生菌饲料中的益生菌活菌数为指标对三株菌在进行固态发酵时的接种顺序、接种比例以及接种量进行考察,确定最终的发酵顺序为:先接G,4h后同时接种Z和Y-5;接种比例为1:1:2;接种量为6%(v/m)。并在此接种条件下多酶益生菌饲料的活菌数达到1.01±0.03×1010cfu/g。 3.在最佳接种条件下,考察不同培养基底料配方对活菌数的影响,确定最适发酵培养配方为:30%白酒酒糟、40%玉米粉、20%麸皮、10%豆粕,在此条件下,确定最适发酵培养液中各无机氮源的添加量为:硫酸铵0.12%、氯化铵0.08%、碳酰二胺0.04%、硝酸铵0.02%,益生菌活菌数提高至1.17±0.09×1010cfu/g。通过考察接种乳酸菌对饲料风味的影响,确定了乳酸菌的最适接种量为10%,但要在枯草芽孢杆菌接种24h后接种乳酸菌发酵48h。 4.通过单因素及响应面实验最终确定多酶益生菌饲料的发酵工艺:发酵时间85h、初始pH值7.0、摇瓶装填量为20.5g、料水比为1:0.8、温度取35℃;在此条件下,多酶益生菌饲料中的活菌数达1.97±0.013×1010cfu/g。在最佳条件下制备的多酶益生菌饲料,经检测其粗蛋白、粗灰分、活菌数、水分等指标均符合肉牛精饲料标准。