【摘 要】
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用杜仲(E.ulmoides Oliv.)的叶、茎作外植体,以MS附加不同浓度的NAA、2,4—D、BA和Kt组成多种培养基诱导愈伤组织.结果以茎的诱导率为高,2,4—D对愈伤组织的诱导是必须的.用
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用杜仲(E.ulmoides Oliv.)的叶、茎作外植体,以MS附加不同浓度的NAA、2,4—D、BA和Kt组成多种培养基诱导愈伤组织.结果以茎的诱导率为高,2,4—D对愈伤组织的诱导是必须的.用正交试验对NAA、2,4—D、BA和Kt的组合及浓度进行了优选.结果表明,NAA、2,4—D的浓度变化对愈伤组织诱导率有显著性差异,BA,Kt的浓度变化无显著性;2,4—D、BA的浓度变化对平均愈伤组织重量有显著性,NAA,Kt的浓度变化无显著性.对愈伤组织诱导率的最佳培养基配方为MS+1.5mg/LNAA+2.0mg/L2,4—D,平均愈伤组织重量的最佳配方为MS+2.0mg/L 2,4—D+0.3mg/L BA.经正交试验优化筛选的培养基进行培养,分析无菌苗、杜仲皮和继代培养第2、4、6、8、10代愈伤组织的次生代谢产物,并进行了蛋白质电泳和愈伤组织的细胞学观察.结果显示:愈伤组织中,蛋白质、游离氨基酸、脂肪酸和绿原酸含量随继代次数的增加而减少,维生素、弹性橡胶丝、桃叶珊瑚甙和黄酮类物质则相反.以维生素B<,2>、维生素C、弹性橡胶丝、绿原酸、桃叶珊瑚甙、芦丁、五羟黄酮含量较高,且达到或超过原杜仲皮的含量.在愈伤组织中缺少原杜仲皮中存在的84KD特异性蛋白质.显微观察有含胶细胞.
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