组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(TSA)对骨肉瘤MG-63的诱导凋亡作用及其机制研究

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目的本研究探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACis)曲古抑菌素(TSA)对骨肉瘤细胞株MG-63的诱导凋亡作用及机制。方法以不同浓度的TSA作用于体外培养的骨肉瘤细胞;采用MTT法检测细胞生长抑制率;以流式细胞技术(FCM)测不同浓度TSA作用前后骨肉瘤细胞周期变化情况。免疫细胞化学技术观察对Survivin基因和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平;用RT-PCR分析TSA作用前后骨肉瘤细胞内P21waf1/cip1mRNA的表达变化。结果TSA能在纳摩尔浓度即可抑制细胞增殖;FCM检测到细胞周期发生改变,G2/M期细胞较对照组增多。免疫组化结果表明该药能明显抑制Survivin和VEGF蛋白的表达。RT-PCR结果表示TSA能显著诱导P21waf1/cip1mRNA表达。上述结果都有明显的量-效关系。结论1.通过提高P21waf1/cip1mRNA的表达,TSA使MG-63细胞周期发生G2/M期阻滞,实现对骨肉瘤细胞的抑制作用。2.TSA能抑制VEGF和survivin蛋白的表达,对抑制骨肉瘤的侵袭和转移可能起着重要作用。
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