p38MAPK在热压所致生精细胞凋亡中的作用及L-NAME对它的影响

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:halicarnasus
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目的 探讨p38MAPK通路在热压诱导的生精细胞凋亡过程中的作用。 方法 将42日龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,24只大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+溶媒组、隐睾+p38MAPK抑制剂(SB203580)组,每组6只大鼠,模型建立按文献操作,戊巴比妥钠(30mg/kg)腹腔内注射麻醉,下腹正中切口,隐睾组大鼠切断右侧睾丸引带,用5-0尼龙线将右侧睾丸固定于腹后壁后关腹,术后未注射任何药物;隐睾+溶媒组及隐睾+SB203580组大鼠右侧睾丸手术处理方法同隐睾组大鼠,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580,每天一次,定时定量(100μg/kg),假手术组将右侧睾丸切断引带后还纳入阴囊关腹。术后第七天处死,留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,常规组织学切片光镜观察各组右侧睾丸生精上皮形态;TUNEL 原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡:免疫组化和Western blot观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。 结果 各组大鼠左侧睾丸及假手术组左侧与右侧睾丸之间重量无明显差异,其余各组右侧隐睾均轻于左侧睾丸重量,但隐睾+SB203580组隐睾重量明显大于隐睾组及隐睾+溶媒组:隐睾组及隐睾+溶媒组之间各检测指标差异无显著性意义;凋亡指数(AI)在隐睾组及隐睾+溶媒组最高,隐睾+SB203580组次之,假手术组最低,差别均有显著性意义;隐睾组及隐睾+溶媒组的生精细胞凋亡率明显高于假手术组和隐睾+SB203580组。免疫组化显示假手术组和隐睾+SB203580组的睾丸生精上皮内无磷酸化p38MAPK表达,其余两组隐睾生精上皮内均有较强的磷酸化p38MAPK表达。Western blot显示,四组均有磷酸化p38MAPK的条带,隐睾组和隐睾+溶媒组表达最强,隐睾+SB203580组次之,假手术组最弱。 结论 1.SB203580能抑制热压诱导的生精细胞凋亡。 2.热压所致的生精细胞凋亡可能与p38MAPK通路有关。
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