纳豆激酶(nattokinase，NK)是一种具有很强纤维蛋白溶解作用的酶，可作为一种很有前景的新型药物予以开发。而酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是一种简单的单细胞真核生物，它没有内毒素，无致病性，被美国食品和药物管理局(FDA)确认为一种安全生物，是酿造、食品、饲料等领域应用最广泛的工业微生物之一。 本研究通过对纳豆激酶基因的PCR扩增、连接、转化，筛选出pMDl8T-NK阳性克隆重组子，测序结果表明克隆的纳豆激酶基因的大小为1192bp，共编码397个氨基酸，与NCBI上公布的与纳豆激酶基因同源率较高的序列进行比对，表明纳豆芽胞杆菌中的纳豆激酶基因与枯草芽胞杆菌(NCBI登录号为AY219901.1)的同源性高达95％，而与豆豉菌来源的(NCBI登录号为DQ178658.1)同源性仅为69％；这说明进一步研究纳豆芽孢杆菌纳豆激酶基因与豆豉菌纳豆激酶基因的差异导致功能上的差别还有一定的空间。 继而纳豆激酶基因与pYES2连接，转化至H158感受态细胞，质粒小量提取后，单酶切、双酶切对重组阳性质粒进行鉴定，β-半乳糖诱导成功转化的重组菌株H158-NK，使其表达，用纤维蛋白平板检测出了重组菌H158-NK的发酵上清液具有纤溶活性。 具有纤溶活性的重组H158-NK的成功构建，为筛选含目的基因的酿酒酵母表达体系提供依据和思路，为后续建立高效的酵母遗传转化体系、以食品作为生物反应载体来获取纳豆激酶蛋白提供一条新途径，为开发可直接食用型溶栓NK产品、微生态制剂或新型心脑血管疾病保健品奠定基础。