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分子诊断在疾病早期诊断及治疗中发挥着重要的作用,现有的常用DNA检测手段具有检测灵敏度高、生物特异性好、检测准确率高的优点,但这些技术亦具有开发难度高、成本昂贵、操作繁杂、对高精密仪器依赖性强、对操作人员科学素养要求高等限制。而聚合物辅助信号放大作为一种新型分子诊断技术,可以原位生成聚合物,其检测灵敏度高、无需借助精密仪器、可裸眼检测的特点使其成为最近研究的热点。本文建立了壳聚糖-硝酸铈铵氧化还原聚合辅助信号放大(CS-CAN RP)体系,并研究了其在病变p53基因DNA片段检测中的应用。利用连接于待检测物质上的还原剂大分子天然物质壳聚糖(CS),与氧化剂硝酸铈铵(CAN)构成氧化还原对,发生氧化还原反应产生活性自由基,从而在常温、常压、水溶液等极其温和的条件下引发单体原位聚合,达到放大被测物质信号的目的。最优检测条件为：反应pH为5.0,SA与表面生物素的结合时间为至少1 h,CS-biotin浓度为1.0 mg/mL,CS-biotin与SA结合时间至少为1.5 h,CAN浓度为5-10 μmol/mL,Redox聚合时间为2 h。在此基础上对模拟分子SA进行了检测,检测限为0.05 ng/mL。在最优检测条件下对DNA检测进行了研究,研究结果表明,CS-CAN RP体系对DNA检测最低限度为0.05 nM,具有较高的检测灵敏度,而且当目标DNA浓度在1.0 nM以上时,检测结果可达到裸眼分辨的效果。接着利用CS-CAN RP体系对导致非小细胞肺癌的病变p53基因DNA序列进行了检测,该病变类型为p53基因248位密码子第一个碱基及249位密码子第三位碱基的突变,当目标DNA序列浓度为1μM时,经由CS-CAN RP体系得到的病变序列及正常序列原位点聚合物厚度分别为300 nm及15 nm；当病变位点为病变类型为p53基因249位密码子第三位碱基的突变,目标DNA序列浓度为1μM时时,经由CS-CAN RP体系得到的病变序列及正常序列原位点聚合物厚度分别为300 nm及40 nm。以上结果表明CS-CAN RP体系可以鉴别病变p53基因DNA片段。在此基础上,利用CS-CAN RP体系对不同浓度的目标DNA序列进行检测,其检测限可达0.5 nM；而且体系对病变p53基因DNA检测的抗干扰能力较好,在杂质DNA浓度低于目标DNA浓度50倍以下时,均有很好的裸眼分辨效果。