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背景和目的:动脉粥样硬化是危害人类健康的主要疾病,对于其机制的研究一直是心血管疾病研究领域中的热点。近年来的大量研究表明:糖基化终产物(Advanced glycosylation end products,AGEs)在动脉粥样硬化的发生发展中起着重要作用。AGEs是还原糖与蛋白质等的游离氨基端通过非酶促反应形成的产物,能通过直接与蛋白交联及与多种细胞特异性受体的结合发挥致动脉粥样硬化作用。AGEs有内源性和外源性之分,吸烟是外源性AGEs的重要来源之一。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一类由配体激活的核转录因子,属Ⅱ型核受体超家族成员,通过抑制炎症反应、抑制平滑肌细胞增殖、影响血管张力等途径在动脉粥样硬化的发生中起保护作用。我们推测AGEs通过减少主动脉PPARγ的表达在动脉粥样硬化的发病机制中起重要作用。氨基胍(aminoguanidine,AG)为亲核肼类化和物,能捕获Maillard反应中羰基产物进而抑制AGEs形成。葛根素(puerarin,Pue)可能是一种醛糖还原酶抑制剂,能抑制蛋白非酶糖化,抗氧自由基损害。两种药物均在大量实验中表现出抗动脉粥样硬化的作用。本研究目的旨在探讨吸烟对大鼠血清AGEs及大鼠主动脉PPARγ表达的影响,并观察氨基胍、葛根素两种药物的干预作用,希望有助于进一步了解吸烟在动脉粥样硬化发生发展中的机制,为临床寻求有效的干预措施提供实验依据。方法:清洁级雄性SD大鼠120只,体重220±10g,按吸烟染毒时间不同随机分为2周(n=30)、4周(n=30)、6周(n=30)、8周(n=30)四个大组。各大组中再按干预条件不同随机分为正常对照组(control, CON组,n=6)、吸烟1小时组(smoking 1 h/d, SM1组,n=6)、吸烟半小时组(smoking 0.5 h/d, SM2组,n=6)、氨基胍干预组(aminoguanidine hydrochloride, AG组,n=6)和葛根素干预组(puerarin, PU组,n=6)。除CON组外,其余各组均采用SD大鼠每日上午在72 L密闭箱内熏5%飞马牌香烟,SM1组、AG组、PU组每日连续熏1 h,SM2组每日连续熏0.5 h。AG组每日吸烟同时给予氨基胍,PU组每日吸烟同时给予葛根素。四个大组的大鼠分别于吸烟持续2,4,6,8周后处死。用荧光法测定大鼠血清AGEs水平,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学法检测大鼠主动脉组织中PPARγmRNA及蛋白的表达水平。结果:1.SD大鼠每天吸烟未引起血糖血脂水平改变。2.SD大鼠每天吸烟一小时,两周后血清AGEs水平上升,四周后达到高峰,六周、八周有下降趋势,但未降至正常。氨基胍、葛根素干预大鼠,血清AGEs水平升高趋势有所减低,四周后尤其明显。每天吸烟时间不同对血清AGEs水平亦有影响,2周后每天吸<WP=5>烟一小时组高于半小时组。3.SD大鼠每天吸烟一小时组、氨基胍干预组8周后主动脉病理切片HE染色光镜下观察与对照组相比未见异常;电镜检查发现每天吸烟一小时组主动脉有动脉粥样硬化早期表现,氨基胍干预组程度较轻。 4.SD大鼠每天吸烟一小时,PPARγmRNA和蛋白的表达随吸烟周数延长而逐渐减少;吸烟同时给予氨基胍、葛根素干预后PPARγmRNA和蛋白的表达比未干预组增加,但仍低于正常水平;每天吸烟时间不同对PPARγmRNA和蛋白的表达水平亦有影响,吸烟一段时间后每天吸烟一小时组低于半小时组。结论:1.吸烟能升高大鼠血清AGEs水平,同时不伴有血糖血脂水平的改变。2.吸烟能降低大鼠主动脉PPARγ的表达,并随吸烟时间延长表达量逐步降低。3.氨基胍、葛根素均能降低吸烟大鼠血清AGEs水平,增加主动脉PPARγ的表达。