耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA调控基因的研究

来源 :上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shy1201107
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实验目的:   1)用头孢西丁纸片扩散法筛查MRSA并对该方法进行评价。 2)在此基础上,研究MRSA中mecⅠ和mec启动子区的多态性分布,分析这种多态性的流行病学及与苯唑西林MIC的关系。 3)根据mecⅠ的多态性,原核表达MecⅠ蛋白,以期进一步研究变异MecⅠ蛋白在MRSA耐药中的作用。 结论: 1.用头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性高,可作为临床确证MRSA的表型检测方法。 2.上海地区临床分离的MRSA菌株多数为同一个分子型别,说明在上海地区存在单一、流行的MRSA克隆。   3.mecⅠ或mec启动子突变在临床MRSA中普遍存在,以mecⅠ202位碱基突变最常见。从一定程度上解释了临床MRSA对苯唑西林耐药的机制。 4.错配PCR作为检测已知基因突变的方法,操作简便、准确率高,值得推广应用。 5.MecⅠ蛋白可用表达载体pGEX-4T-2在大肠杆菌BL21中表达,为进一步研究变异MecⅠ蛋白在MRSA耐药中的作用奠定了基础。
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