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本论文首先对蚯蚓纤溶酶EFE-Z的氨基酸序列进行同源性分析，为以后的分离纯化研究提供方便。
本文根据毕赤酵母密码子偏好性，重新设计蚯蚓纤溶酶基因EFE-3D，而后将其分为两段分别合成：一段为600bp，名为F123；另一段为190bp，名为F4。利用重叠延伸组装的方法分别合成两段，再利用PCR方法，将这两段基因拼接起来，合成完整的蚯蚓纤溶酶基因EFE-3D。
本文将重组表达载体pPIC9K-EFE-3D线性化处理，利用电转化将它们导入毕赤酵母细胞中，使之整合到毕赤酵母基因组中。在无组氨酸的营养缺陷型平板上筛选阳性重组转化子，将筛选得到的转化子涂布到梯度浓度G418平板上，进一步筛选多拷贝转化子。