小鼠小脑深部核与小脑皮层三叉神经触觉反应区的解剖和功能关系

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目的我们之前报道过吹风刺激同侧触须垫能在小脑皮层Crus II区分子层(Molecular layer, ML)和PC引起抑制性反应。然而,这些对吹风做出反应的PC轴突末端在DCN上的投射位置以及它们之间的电生理学反应关系还不清楚。因此,我们应用电生理、神经元顺行追踪技术和组织化学等方法研究了在体小鼠小脑皮层Crus II区的三叉神经触觉反应区与DCN之间的解剖和功能上的关系。实验方法1.电生理记录用电生理膜片钳的场电位和贴附式记录方式记录了小鼠小脑皮层Crus II区分子层的场电位、DCN的场电位和DCN神经元活动。2.神经元的顺行追踪用生物素葡聚糖胺(biotinylated dextran amine,BDA)顺行性追踪的方法研究PC投射到DCN的位置3.注射位置的确定小脑表面用亚甲基蓝染色的方法确定活体小鼠注射BDA的位置。4.组织化学小鼠注射BDA后饲养4-5天后麻醉,经心灌流4%的多聚甲醛固定后取脑,再在福尔马林中固定3-4天后冠状切片(切片厚度为200m),生物素染色后照相,观察投射位置。结果我们的研究发现对触觉产生抑制性反应的浦肯野细胞的轴突投射到DCN间位核(interposed cerebellar nucleus, ICN)的前部(anterior part, IntA)、后部(posterior part, IntP)以及背外侧峰(dorsolateral hump, IntDL)■在ICN中,场电位记录情况下触觉刺激引起一个表现为两个连续的负向波反应即N1,N2,细胞外记录所得到的结果与其相似,表现为出现两个与之相对应的峰电位频率增加(N1,N2)。吹风刺激能引起场电位反应的最小吹风持续时间为5ms;当吹风刺激的持续时间≥30 ms时,在ICN中观察到刺激的关闭反应(Roff),但是面部吹风刺激持续时间的增长并没有明显的影响刺激开始(Ron)(N1和N2)和关闭(Roff)反应的幅度。此外,在ICN中N1的潜伏期和到达峰值的时间明显比在ML中的N1要短,但是N2的潜伏期和到达峰值的时间明显比ML中的P1延迟。结论小脑皮层Crus Ⅱ的PC的三叉神经区的投射区主要在同侧的ICN的侧部。面部感觉信息,至少有一部分是由Crus Ⅱ中的PC的轴突传输到ICN中,并诱发了ICN神经元的兴奋性反应。
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