【摘 要】
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[目的] p14ARF基因转染人结肠癌LOVO细胞后,能否对体外生长的LOVO细胞起抑制增殖的作用;与化疗药物5FU联用能否加强5FU对结肠癌LOVO细胞的生长抑制作用,提高LOVO细胞对5FU的
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[目的] p14ARF基因转染人结肠癌LOVO细胞后,能否对体外生长的LOVO细胞起抑制增殖的作用;与化疗药物5FU联用能否加强5FU对结肠癌LOVO细胞的生长抑制作用,提高LOVO细胞对5FU的敏感性.[方法]将含人完整p14ARF全长序列的pCDEF3质粒和pCDEF3空载体质粒通过脂质体介导分别转染入结肠癌LOVO细胞中,G41 8筛选相应的阳性细胞克隆LOVO/p14细胞和LOVO/vec细胞.采用RT-PCR和Western blot方法检测转染前后LOVO细胞中p14ARF基因的mRNA转录和蛋白的翻译表达.MTT法测定比较未处理的LOVO细胞、LOVO/vec细胞、LOVO/p14细胞生长曲线的变化;流式细胞仪进行细胞周期和凋亡分析;透射电镜观察.联合不同浓度的5FU作用于LOVO细胞、LOVO/vec细胞、LOVO/p14细胞,MTT法测定各组细胞的生长曲线的变化.[结论] p14ARF基因转染后,结肠癌LOVO细胞生长在一定程度上受到抑制.p14ARF基因和化疗药物5FU联合用于结肠癌LOVO细胞能够加强5FU的生长抑制作用,明显提高LOVO细胞对5FU的敏感性.
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