目的　　TLRs是先天性免疫受体家族之一，近年研究发现通过其内源性配体具有触发炎症和组织修复的作用，在肾小球疾病患者非选择性蛋白尿中存在纤维蛋白原等TLR4内源性配体，足细胞表面又表达TLR4，因而提出非选择性蛋白尿中存在的TLR4内源性配体能够激活TLR4信号通路，引起炎症因子释放，导致足细胞损伤及肾小球进行性硬化。本研究将应用免疫组化方法检测阿霉素诱导的小鼠肾小球硬化模型肾组织中的TLR4、Fibrinogen、NF-KB、MCP-1及TGF-β1的表达，探讨TLR4在肾小球硬化机制中的作用及可能机制。　　材料与方法　　一、阿霉素肾病模型建立　　SPF级雄性BALB/c小鼠50只，体重20±2克，6-8周龄。随机分为实验组(40只)，对照组（10只）。实验组小鼠尾静脉一次性注入阿霉素10mg/kg,对照组小鼠尾静脉一次注射等量生理盐水，以标准饲料饲养，自由摄食及饮水。　　二、标本收集　　各组均于注射阿霉素前一天、注射阿霉素第1周、2周、4周及6周用代谢笼收集24小时尿液;对照组于第6周，实验组于收集尿液结束当天各取小鼠6只4％水合氯醛麻醉，下腔静脉采血，用于血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯及尿素氮、肌酐的测定;剖腹取肾，留取肾组织标本，用于光镜、电镜及免疫组化检查。　　三、检测指标　　采用柳氮磺酸比浊法检测尿蛋白定量，应用自动生化仪检测血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯及尿素氮、肌酐水平;肾组织进行HE、PAS染色及透色电镜检查;应用免疫组化法检测肾组织中TLR4、Fibrinogen、NF-KB、MCP-1及TGF-β1的表达。　　结果　　一、尿蛋白及血生化指标　　实验组尿蛋白从第1周开始增加，第2周达高峰，4周、6周与2周相比稍有下降，但与对照组相比均有显著性差异(p＜0.01，0.01);血清白蛋白(ALB)于第1周开始下降(p＜0.01)，2周达最低值，4周、6周较2周稍升高，但仍处低水平状态，与对照组相比有显著统计学差异(p＜0.01，0.01);甘油三脂(TG)、胆固醇(ChoL)于第1周开始升高(p＜0.01)，第2周达高峰，第4、6周较第1、2周下降，但仍处于高水平状态(p＜0.01，0.01);尿素氮(BUN)于第1周开始升高，第2周达高峰，第4、6周较第1、2周稍有下降，但仍处于高水平状态(p＜0.01，0.01);肌酐(Cr)无显著性升高。　　二、光镜　　实验组第1周肾小球无明显变化，肾小管可见蛋白管型;第2周部分肾小球可见节段性硬化，肾小管蛋白管型增多，较易见到;第4周、6周可见50％以上肾小球中出现节段性硬化，肾小管扩张明显，可见大量蛋白管型及局部间质纤维化;对照组肾小球及肾小管无变化。　　三、电镜　　实验组于第1周偶可见足突融合，第2周足突融合更广泛，第4周、6周出现足突融合变形，体积变大，胞质中微丝增多，并出现囊泡及包涵体，毛细血管袢闭塞，充血，大量红细胞填塞，内皮细胞孔消失，基底膜正常。对照组足突清晰完整，未见融合。　　四、TLR4、Fibrinogen、NF-KB、MCP-1及TGF-β1的免疫组化染色结果　　正常对照组TLR4少量表达于肾小球足细胞的胞膜及胞浆。免疫组化半定量分析显示，TLR4在阿霉素肾病不同组别中的平均光密度依次递增。实验组2周、4周、6周与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01);Fibrinogen在阿霉素肾病不同组别中的表达依次递增，实验组1周、2周、4周、6周与对照组相比差异均有统计学意义(均是P＜0.01)，实验组之间比较也均有统计学差异(均是P＜0.01);NF-κB在阿霉素肾病不同组别中的表达逐渐增加，实验组1周、2周、4周、6周与对照组相比差异均有统计学意义(均是P＜0.01);MCP-1在阿霉素肾病的不同组别中表达依次递增，实验组1周、2周、4周、6周组与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05，P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01);TGF-β1在阿霉素肾病实验组1周时与对照组相比表达无统计学差异(P＞0.05)，实验组2周、4周、6周组与对照组相比差异均有统计学意义（均是P＜0.01）。　　结论　　1.单次鼠尾静脉注射10mg/kg阿霉素可成功的诱导BALB/c小鼠局灶节段性肾小球硬化模型。　　2.我们用免疫组化染色的方法证实了小鼠肾小球足细胞上结构性的表达TLR4。　　3.纤维蛋白原是TLR4的内源性配体，在阿霉素肾病小鼠肾小球内纤维蛋白原表达增高，与足细胞TLR4、NF-KB、MCP-1、TGF-β1的表达呈正相关关系，提示TLR4信号通路可能被内源性配体，即纤维蛋白原激活参与局灶节段性肾小球硬化的发病过程。