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目的: 探讨一种新型活性化合物，7-二氟甲氧基-5,4-二甲氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxy-5,4-dimethoxygenistein，DFMG)，是否通过抑制TLR4-MyD88信号转导通路拮抗溶血性磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine，LPC)诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC-12）氧化应激损伤。 方法: 体外培养HUVEC-12细胞，TLR4-cDNA质粒和TLR4-shRNA质粒分别转染细胞24h得到TLR4过表达HUVEC-12细胞和TLR4沉默HUVEC-12细胞。用RT-qPCR和Western blotting鉴定是否分别成功过表达和沉默TLR4。用30μmol/L的LPC处理以上两种细胞24 h，然后加入3.0μmol/L的DFMG孵育24h。应用ELISA分析DFMG对LPC诱导损伤的HUVEC-12细胞TLR4-MyD88通路途径中IL-6、TNF-α的影响，采用Western blotting检测DFMG对于LPC诱导损伤的HUVEC-12细胞TLR4-MyD88通路途径中TLR4、MyD88的影响。 结果: ①TLR4-cDNA质粒转染后，相对于空白对照组，荧光定量PCR结果显示TLR4过表达组细胞的TLR4基因表达增加(P＜0.01)，Westernblotting结果显示TLR4过表达HUVEC-12细胞的TLR4蛋白表达增加。TLR4-shRNA质粒转染后，相对于空白对照组，荧光定量PCR结果显示TLR4沉默HUVEC-12细胞的TLR4基因表达明显降低，差异具有统计学意义（P＜0.01）。Western blotting结果显示TLR4沉默HUVEC-12细胞的TLR4蛋白表达明显降低。验证TLR4-cDNA质粒和TLR4-shRNA质粒分别转染后获得TLR4过表达HUVEC-12细胞和TLR4沉默HUVEC-12细胞。 ②ELISA结果显示:LPC损伤组、TLR4过表达组和TLR4过表达+LPC损伤组的IL-6、TNF-α分泌量相对空白对照组均明显上升(P＜0.05)，其中TLR4过表达+LPC损伤组增高最为显著(P＜0.05）。TLR4沉默组和TLR4沉默+LPC损伤组的IL-6、TNF-α分泌量较LPC损伤组均明显下降(P＜0.05）。TLR4过表达+LPC损伤+DFMG组的IL-6、TNF-α表达量与TLR4过表达+LPC损伤组比较显著下降(P＜0.05）。TLR4沉默+LPC损伤+DFMG组的IL-6、TNF-α表达量与TLR4沉默+LPC损伤组和LPC损伤组比较均明显下降(P＜0.05）。DFMG组的IL-6、TNF-α分泌量同空白对照组相当，差异无统计学意义(P＞0.05）。 ③Western blotting结果显示:LPC损伤组、TLR4过表达组和TLR4过表达+LPC损伤组的TLR4、MyD88蛋白表达量相对空白对照组有所上升，其中TLR4过表达+LPC损伤组上升最为明显。TLR4沉默组和TLR4沉默+LPC损伤组所表达的TLR4、MyD88蛋白相对于LPC损伤组明显下降。TLR4过表达+LPC损伤+DFMG组的TLR4、MyD88蛋白表达量与TLR4过表达+LPC损伤组比较显着下调。而TLR4沉默+LPC损伤+DFMG组比TLR4沉默+LPC损伤组和LPC损伤组的TLR4、MyD88蛋白量都明显减少。DFMG组的TLR4、MyD88蛋白表达量与空白对照组差异不明显。 结论: ①TLR4-MyD88信号通路介导LPC诱导的HUVEC-12细胞氧化应激损伤。 ②通过抑制TLR4-MyD88信号转导拮抗LPC的诱导HUVEC-12细胞损伤是DFMG保护血管内皮细胞氧化应激损伤作用的机制之一。