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以毒攻毒是中医治疗恶性肿瘤的重要手段之一。中医长期临床实践证明大毒中药斑蝥具有显著的抗肿瘤效果。毒性成分斑蝥素(CTD)是斑蝥抗肿瘤的有效成分,是蛋白磷酸酶PP1和PP2A的选择性抑制剂,但其安全使用范围窄,对胃肠道、泌尿系统及肾脏功能均有一定的损伤,限制了其在临床上的广泛应用。聚合物胶束能将难溶性药物包载于其疏水性内核中,提高药物在肿瘤组织的富集,延长体内循环时间。因此构建载CTD聚合物胶束纳米给药系统,提高CTD的肿瘤靶向性,降低其毒副作用具有十分重要的意义。载CTD聚合物胶束纳米给药系统的构建。采用基团贡献法计算CTD、PLA、PLGA、PCL的部分溶解度参数并进行比较,确定聚合物材料疏水端类型;以载药量、包封率、粒径、CMC为评价指标,确定载体材料的分子量;以载药量、包封率和粒径等为评价指标,通过单因素考察确定胶束的制备方法,HPLC法测定胶束中CTD的含量。结果表明,CTD与PLGA相容性最好,通过对比,选用mPEG2000-PLGA2000作为载体材料,薄膜分散法制备CTD胶束,包封率和载药量分别为(89.88±1.01)%、(4.30±0.05)%,粒径为(25.32±1.25)nm,PDI为(0.08±0.02)。载CTD聚合物胶束纳米给药系统的质量评价。透射电镜观察胶束的形貌,呈大小均一的球状结构。采用DSC和XRD法考察药物在聚合物胶束中的存在形式,结果表明,CTD以无定形状态存在于胶束中。考察载药胶束的稳定性,-4℃放置20天,粒径均匀,HPLC法测定药物含量,无药物泄露现象;加入0.9%Na Cl、200 U/m L肝素、0.1 mg/m L牛血清白蛋白(BSA),37℃、120 r/min摇床孵育24 h,胶束粒径无明显变化。考察载药胶束在血浆中的稳定性,HPLC法进行分析。结果表明,与原药相比,胶束可以明显提高CTD在血浆中的稳定性。体外溶血试验表明,空白胶束和载药胶束均不会造成溶血现象。采用透析法考察胶束的体外释放性能,结果表明,CTD胶束具有明显的突释现象,其释放曲线符合一级释药方程。载CTD聚合物胶束纳米给药系统体内外抗肿瘤作用研究。采用MTT法测定空白胶束、CTD原药和CTD胶束对人肝癌细胞Hep G2、人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。结果表明:空白胶束作用于各细胞24 h、48 h后均无明显的抑制作用;作用48 h,CTD原药对Hep G2、MCF-7的IC50值分别为(2.57±0.25)μg/m L、(2.50±0.18)μg/m L,CTD胶束对Hep G2、MCF-7的IC50值分别为(1.75±0.20)μg/m L、(2.10±0.13)μg/m L,胶束可以明显提高CTD对Hep G2、MCF-7细胞的抑制作用。采用Hoechst 33342单染法、AO/EB双染法检测Hep G2肿瘤细胞凋亡情况。结果表明,相同药物浓度的CTD原药和CTD胶束作用于肿瘤细胞,CTD胶束更易引起肿瘤细胞的凋亡。建立昆明小鼠肝癌H22皮下移植性肿瘤模型,考察CTD胶束的体内抗肿瘤作用。将荷瘤小鼠随机分为4组:模型组(生理盐水组,0.1m L/10 g)、胶束组(400μg/kg)、原药组(400μg/kg)、环磷酰胺组(20mg/kg)。隔天给药,采用尾静脉注射方式。计算肿瘤体积、抑瘤率,HE染色法观察肿瘤组织的病理学变化。结果显示,胶束、原药对小鼠肝癌H22的抑制率分别为44.40%、28.05%,肿瘤病理切片显示,与原药组相比,胶束组肿瘤坏死区域明显增大。载CTD聚合物胶束纳米给药系统减毒作用研究。采用MTT法测定空白胶束、CTD原药和CTD胶束对人正常肝细胞L-02的增殖抑制作用。结果显示空白胶束对L-02无抑制作用,作用24 h,CTD原药和CTD胶束的IC50值分别为(2.12±0.22)μg/m L、(2.64±0.15)μg/m L,表明胶束可以明显减少CTD对正常细胞的毒性。通过计算小鼠脏器系数,HE染色法观察肾脏组织的病理学变化,测定小鼠血清生化指标,比较CTD胶束和CTD原药对小鼠毒副作用。结果显示原药组与模型组相比,脾脏系数明显降低,胶束组与模型组相比,无显著性差异;原药组33.3%小鼠肾脏系数超出正常范围,而胶束组均处于正常范围之内;肾脏病理切片显示,与模型组相比,原药组既出现血管球变小,囊腔变大的现象,又出现肾小球体积增大,肾小管边缘模糊水肿现象,而胶束组与模型组相比,无明显差异;CTD胶束可显著降低荷瘤小鼠血清中的UA含量使之趋于正常水平。肿瘤细胞对聚合物胶束纳米给药系统摄取性能研究。以香豆素-6为模型药物,制备载香豆素-6的mPEG2000-PLGA2000聚合物胶束,荧光显微镜观察Hep G2细胞对香豆素-6原药以及香豆素-6胶束的摄取状况,采用荧光分光光度计和高内涵细胞成像系统对香豆素6的摄取进行定量分析。结果表明mPEG2000-PLGA2000制备的载药胶束可以明显提高细胞对药物的摄取能力。综上所述,本论文构建了载CTD聚合物胶束纳米给药系统,体外和体内实验表明,胶束可以明显提高肿瘤细胞对CTD的摄取能力,提高CTD的抗肿瘤作用,减少CTD的毒副作用。