乳腺的泌乳是乳腺发育和激素共同作用的结果,激素在泌乳过程中起着重要的作用。本实验以荷斯坦奶牛为实验材料,通过体外培养奶牛乳腺上皮细胞,添加催乳素、雌激素、胰岛素并采用激光扫描共聚焦显微技术、Western blotting、Real-Time PCR等来观察乳腺上皮细胞中瘦素及其受体表达和泌乳功能的变化规律,旨在了解外源激素与瘦素的关系,寻求人工调控乳产量和乳质量的新方法、新技术和新途径,为奶牛乳腺发育和泌乳功能调控提供理论基础和试验根据。研究结果表明,用组织块培养法成功获取了泌乳期奶牛乳腺上皮细胞。采用激光扫描共聚焦显微技术对泌乳期奶牛乳腺上皮细胞中瘦素和瘦素受体的表达定位进行检测,结果显示;瘦素在奶牛乳腺上皮细胞中表达,瘦素受体在乳腺上皮细胞中被检测到,但表达水平很低。三种激素处理细胞后,应用Western blotting对奶牛乳腺上皮细胞中瘦素和瘦素受体的蛋白表达量进行研究,结果显示：催乳素、雌激素能显著提高瘦素及其受体的表达(P<0.05),且催乳素高于雌激素,胰岛素影响不显著(P>0.05)。荧光定量RT-PCR结果表明,催乳素和雌激素能提高瘦素及其受体mRNA表达量(P<0.05),胰岛素没有显著影响(P>0.05)。采用高效液相色谱技术及甘油三酯试剂盒研究激素对奶牛乳腺上皮细胞泌乳的作用,结果表明：催乳素、雌激素和胰岛素处理乳腺上皮细胞培养液中β-酪蛋白升高均较显著(P<0.05)。催乳素和雌激素处理乳腺上皮细胞培养液中乳糖升高较显著(P<0.05),胰岛素处理组中乳糖升高不显著(P>0.05)。而三种激素对奶牛乳腺上皮细胞乳脂分泌能力均没有显著影响(P>0.05)。