苏云金芽胞杆菌CTC的S-层蛋白与晶体蛋白共存关系及其应用研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:Wangjun33
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在苏云金芽胞杆菌CTC中检测到了S-层蛋白。通过蛋白质序列比对的方法发现该菌的S-层蛋白可能参与形成晶体状内含体。进一步以免疫印迹、免疫荧光、免疫电镜以及基因缺失的方法确证,该菌株的晶体蛋白CTC和100 kDa的S-层蛋白是同种蛋白。研究还发现了另外一种S-层蛋白,CTC2,该蛋白质大小可能在80 kDa左右,通过测序与基因序列比对发现该基因序列与S-层蛋白CTC的编码基因有很高的相似程度。实验还对两个S-层蛋白表达和转录时相作了检测分析。 细菌的S-层蛋白是在细菌中分布极广的表层单分子层晶格网状包膜结构,其研究已经受到普遍重视。但是,S-层蛋白的功能并未被完全了解。本研究以苏云金芽胞杆菌CTC菌株的S-层蛋白为研究对象,利用S-层蛋白双缺失菌株为材料,讨论了其对细菌细胞形态、传代繁殖、耐碱性以及质粒转移的作用及生理功能。结果表明,S-层蛋白缺失以后,细菌形态发生严重变化。液态培养下,细菌生长减缓,平板培养时,相反增快。耐碱性实验表明S-层蛋白可能对产生适应碱性环境的个体有特殊意义。此外,S-层蛋白对于质粒DNA的转化具有抵抗作用。 将来自于苏云金芽胞杆菌幕虫亚种CTC菌株的S-层蛋白基因ctc和ctc2同时缺失,得到了S-层蛋白缺失菌株 Tr5。为了在苏云金芽胞杆菌的表面展示和胞外表达丝氨酸乙酰内酯酶以增强抗欧文氏胡萝卜软腐病的能力,将一个使苏云金芽胞杆菌4Q7具有抵抗植物软腐病能力的基因,aiiA4Q7,与S-层蛋白基因 ctc 中负责该蛋白分泌到胞外和锚定至细胞壁的上游序列相融合。所构建的融合基因slh-aiiA在 Tr5中表达以减少S-层蛋白的竞争。实验结果表明在细胞外表达的SLH-AiiA4Q7融合蛋白有较高的降解N-乙酰高丝氨酸环内酯 AHL的能力,并且对蛋白酶和紫外照射有很强的抗性。为了研究在不同苏云金芽胞杆菌中表面表达丝氨酸乙酰内酯酶的效果,以来自苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白ICP3A的强启动子高效表达的胞内丝氨酸乙酰内酯酶AiiA4Q7作为对比,同时采用了9个苏云金芽胞杆菌工程菌株,它们分别在 Tr5 和另外两个杀虫晶体的苏云金芽胞杆菌突变菌株BMB171和4Q7中表达单一的胞内或胞外AiiA4Q7蛋白,或者共表达胞内外AiiA4Q7。实验结果表明,相较于表达单一胞内AiiA4Q7蛋白的重组菌而言,表达胞外AiiA4Q7的重组菌可以高效抑制欧文氏胡萝卜软腐菌引起的软腐病。在相同实验条件下,9个菌中以Tr5作为受体菌在胞外表达了丝氨酸乙酰内酯酶的重组菌效果最好。在进一步以野生型苏云金芽胞杆菌作为对照时发现,工程菌抑制欧文氏胡萝卜软腐病的效果有了较大的提高。实验还对软腐病抗病机制作了一定的研究。研究将为欧文氏胡萝卜软腐菌引起的植物软腐病生物控制提供一种可行的防治方法。
其他文献
随着信息服务高带宽化,内容形式多元化,提供方式智能化的需求不断增长,无线网络正朝着更高传输速率、更广覆盖范围、融合多种异构接入网络,并与多种周边网络高效协同的方向发展。
社会生活中难免会遇到各种各样的突发事件,包括自然灾害和人为事故。为了预防和减少突发事件的发生,减轻突发事件所带来的社会危害,建立起及时有效的应急通信指挥系统是处理这些
在我校“生本课堂”教学改革背景下,小组合作学习已经成为一种课堂常态.采用主动自学、互动研学、启智导学等教学环节,甚至是让学生教学生的方法培养学生,发挥学生的潜能,让
期刊
摘要:当代初中生英语口语能力普遍较差,情境教学法利用多媒体展示、师生互动、生生互动等方式营造课堂氛围,注重学生的情感体验和在活动过程中的能力提升,激发学生自主学习的兴趣,对于提高学生英语口语能力具有重要作用。  关键词:情境教学;现状;应用  随着社会的发展,国际间交流的频繁,英语交际变得越来越重要。而目前,中学生的整体口语水平普遍不高,因此创新教学模式,找到一套行之有效的提高学生口语水平的教学方
随着信息化程度的加深,越来越多的企业选择利用局域网来进行网络互联,使得利用企业局域网上网的用户数量快速增长,并由此产生了海量的网络行为数据。局域网用户行为分析技术的研
基于面板数据似不相关回归方法所建立的模型对P2P网贷平台商业模式和平台价值实现之间相关性的估计结果显示:各类安全保障模式均与平台收益显著负相关,各类安全保障模式均与
随着互联网技术和嵌入式技术的快速发展,具有网络功能的嵌入式设备开发成为一个十分热门的研究领域。另一方面,如何对敏感的公共场合进行全天候、自动、实时监控,是人们普遍
高速接入网络安全问题通常采用加密和认证技术解决,已在国内外得到推广应用的无源光网络所采取的安全机制大多使用加密与认证简单结合的方式。EPON采用搅动加密技术与静默机制
随着互联网和物联网的快速发展,业务的种类和数量不断增加,另外伴随着光传送网络规模的不断扩大,光传送网络将面临着综合化、智能化以及规模化的需求。光传送网络必定向着分
摘要:随着科学技术的不断发展,教育技术的更新,新媒体环境下的微课教学己经慢慢走近了我们的日常教育教学过程之中,微课教学是教师为了更好的给学生讲授知识,而针对其重点、难点、疑点等,通过制作视频、动画、图片并且插入背景音乐或者旁白的一种教学形式。  目前,我国对于微课教学的研究仍然处于一个初级阶段,对于微课教学的实际应用还不成熟,微课更多的是教师相互之间交流工具,因此,对于微课在教育教学中的应用有深入