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目的：掌握乳腺癌原代细胞的培养方法,探讨胶原凝胶包埋培养法体外药敏检测技术(CD-DST)筛选敏感性抗癌药物的可行性,分析TAC方案新辅助化疗前后乳腺癌原代细胞对5个化疗药物(多西他赛、吡柔比星、表柔比星、长春瑞滨、顺铂)敏感性的变化。方法：1.选取2011年1月-2012年1月未行新辅助化疗而直接手术的291例乳腺癌新鲜瘤组织作为化疗前组；选取同期行4-6个周期TAC方案(多西他赛75mg/m2+毗柔比星40mg/m2+环磷酰胺600mg/m2, q3w)新辅助化疗的34例乳腺癌患者中未达到病理完全缓解的27例新鲜瘤组织作为化疗后组,每一标本均进行体外细胞分离、原代培养。2.将乳腺癌原代细胞包埋在人工细胞外基质Ⅰ-型胶原凝胶体中,构成与体内细胞相似的生长微环境,三维立体培养,加入适宜浓度(根据药物血浆浓度时间曲线下面积计算出)的化疗药物(多西他赛、表柔比星、吡柔比星、长春瑞滨及顺铂)接触,最后经过细胞染色及利用图像分析对药物敏感性做出准确的评价。其结果用T/C的百分比值表示,其中T为加药处理组的光密度值,C为空白对照光密度值。结果判定,T/C<50%表示肿瘤对化疗药物敏感,T/C>50%表示肿瘤对化疗药物不敏感。某化疗药物单药有效率=对该化疗药物敏感的患者数/患者总数。3.所有的数据均采用SPSS17.0统计学软件进行分析。计数资料组间的比较采用χ2检验。以P<0.05作为差异有统计学意义的检验标准。结果：1.成功培养出人类乳腺癌原代细胞：乳腺癌细胞分离培养约2周后呈较稳定地生长增殖状态,癌细胞呈梭行贴壁生长,中间夹杂少量间质细胞呈多角形伸展状生长。2.胶原凝胶包埋培养法体外药敏检测技术(CD-DST)可评价率高、所需标本量小(3×103个细胞／滴)的特点,可扩大该技术的应用范围,弥补了目前其它体外药敏技术的不足,具有临床应用的可行性。3.未行TAC方案新辅助化疗的乳腺癌,5个化疗药物单药有效率由高到低依次为：多西他赛(50.9%)、吡柔比星(48.5%)、表柔比星(42.6%)、顺铂(29.2%)、长春瑞滨(23.7%),其中多西他赛和蒽环霉素单药有效率明显高于顺铂和长春瑞滨(P<0.05),而多西他赛与蒽环霉素之间以及顺铂与长春瑞滨之间单药有效率的差异不具有统计学意义(P>0.05)。多西他赛在老年性乳腺癌患者组(年龄≥65岁)的单药有效率低(χ2=9.202,P=0.002)。病理学组织分级低(组织学Ⅰ-Ⅱ级)和浸润性小叶癌对吡柔比星不敏感(P<0.05)。4.TAC方案新辅助化疗后的乳腺癌,5个化疗药物单药有效率由高到低依次为：顺铂(48.1%)、多西他赛(33.3%)=长春瑞滨(33.3%)、吡柔比星(22.2%)=表柔比星(22.2%)。单药之间进行两两比较,顺铂单药有效率高于吡柔比星和表柔比星(χ2=3.979,P=0.046),其它组间差异不具有统计学意义(P>0.05)。5.TAC方案新辅助化疗后的乳腺癌,吡柔比星(χ2=6.839,P=0.009)和表柔比星(χ2=4.156,P=0.041)的单药有效率比化疗前降低,但顺铂的单药有效率增高(χ2=4.156,P=0.009),对多西他赛和长春瑞滨敏感性变化不明显(P>0.05)结论：1.本实验成功的从乳腺癌新鲜组织中分离培养出人类乳腺癌原代细胞。2.胶原凝胶包埋培养法体外药敏检测技术(CD-DST)具有筛选敏感性抗癌药物的可行性,且临床疗效相关性好,能够指导临床选择化疗敏感性药物。3.经TAC方案新辅助化疗后,乳腺癌原代细胞对吡柔比星和表柔比星产生耐药,但对顺铂敏感性增加。因此,顺铂成为蒽环类耐药性乳腺癌的后续化疗方案的最佳化疗药物之一,如TP方案、NP方案。