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第一部分:临床研究 目的:通过观察不同穴位电针对分娩产妇及新生儿的影响,以期从MAPK/ERK信号通路揭示其分娩镇痛的分子生物学机制,探索一种非药物、操作简单、对母婴安全有效、无损伤的分娩镇痛方法,为应用电针进行分娩镇痛提供科学依据。 方法:将符合纳入标准的120例分娩产妇,按随机数字表分为四组,即:空白对照组,辨证取穴电针组,电针三阴交加合谷组,药物镇痛组,每组30例,进行相应治疗并对照观察电针对产妇及新生儿的影响。记录产程观察第一产程进展情况,参照Ⅳ级疼痛判断法及 VAS评分法了解电针治疗后的镇痛效果,应用容积法检测产后2h阴道出血量,并应用新生儿Apgar评分法对胎儿出生后1分钟、5分钟、10分钟进行常规评分。所有数据采用SPSS20.0统计分析软件处理。 结果: 1.第一产程进展情况: (1)潜伏期:两电针组与药物镇痛组产妇的潜伏期时间均明显缩短(P<0.01),由高到低依次为:空白对照组>辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组>药物镇痛组。 (2)活跃期:两电针组与药物镇痛组产妇的活跃期时间均明显缩短(P<0.01),由高到低依次为:空白对照组>辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组>药物镇痛组。 2.镇痛效果: (1)两电针组与药物镇痛组产妇分娩镇痛的总有效率均明显升高(P<0.01),由高到低依次为:药物镇痛组>辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组>空白对照组。 (2)两电针组与药物镇痛组产妇的VAS评分在镇痛后1h、宫口开7-8cm、宫口开全时均明显降低(P<0.01),由高到低依次为:空白对照组>辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组>药物镇痛组。 3.产后出血量:两电针组产妇产后2h阴道出血量均明显减少(P<0.01),药物镇痛组的产妇产后2h阴道出血量无统计学意义(P>0.05),四组产妇产后2h阴道出血量由高到低依次为:空白对照组/药物镇痛组>辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组。 4.新生儿 Apgar评分:两电针组产妇生产的胎儿出生后1分钟、5分钟的Apgar评分均明显提高(P<0.01),药物镇痛组产妇生产的胎儿出生后1分钟、5分钟的Apgar评分无统计学意义(P>0.05),胎儿出生后1分钟、5分钟的Apgar评分由高到低依次为:辨证取穴电针组/电针三阴交加合谷组>空白对照组/药物镇痛组。各组产妇生产的胎儿出生后10分钟的Apgar评分均无统计学差异(P>0.05)。 结论: 1.对产妇的影响:电针刺激可以减轻分娩疼痛,缩短第一产程,减少产后2h阴道出血量。 2.对新生儿的影响:正常分娩中应用电针可以降低新生儿窒息的发生。 第二部分:基础研究 目的:从MAPK/ERK信号通路探讨不同穴位电针对分娩大鼠的镇痛作用,并观察其分娩后大脑灰质顶叶区、脊髓腰膨大段中信号分子Raf、ERK、CREB的蛋白及基因表达和子宫肌层组织中效应分子DYN的蛋白表达影响,从细胞分子水平揭示电针镇痛的潜在作用机制,为临床分娩镇痛提供一种安全有效、操作简单的治疗方法,也为电针对分娩镇痛的进一步研究提供科学依据和理论基础。 方法:将造模成功的120例SD怀孕大鼠,按随机数字表分为四组,即:空白对照组,电针夹脊穴组,电针三阴交加合谷组,药物镇痛组,每组30例。用热水甩尾法测定各组大鼠分娩时的痛阈值,同时应用Western blot、Real-time PCR等现代分子生物学技术检测四组大鼠大脑灰质顶叶区、脊髓腰膨大段中MAPK/ERK通路信号分子Raf、ERK、CREB的蛋白及基因表达和子宫肌层组织中效应分子DYN的蛋白表达。所有数据用SPSS20.0统计分析软件进行统计学处理。 结果: 1.痛阈值方面:治疗前,各组大鼠分娩时的痛阈值均无统计学差异(P>0.05);治疗后,两电针组与药物镇痛组大鼠分娩时的痛阈值均明显升高(P<0.01),由高到低依次为:药物镇痛组>电针夹脊穴组/电针三阴交加合谷组>空白对照组。 2.基因表达方面:各组大鼠大脑灰质中 MAPK/ERK通路信号分子Raf、ERK、CREB的mRNA表达含量均无统计学差异(P>0.05);两电针组与药物镇痛组均能明显降低大鼠脊髓中信号分子Raf、ERK、CREB的mRNA表达含量(P<0.01),其表达含量由高到低依次为:空白对照组>电针夹脊穴组/电针三阴交加合谷组>药物镇痛组。 3.蛋白表达方面:各组大鼠大脑灰质中 MAPK/ERK通路信号分子Raf、ERK、CREB的蛋白表达量均无统计学差异(P>0.05);两电针组与药物镇痛组均能明显降低大鼠脊髓中信号分子Raf、ERK、CREB的蛋白表达含量(P<0.01),其蛋白灰度值由高到低依次为:空白对照组>电针夹脊穴组/电针三阴交加合谷组>药物镇痛组;两电针组与药物镇痛组均能明显升高大鼠子宫肌层组织中效应分子DYN的蛋白表达含量(P<0.01),其蛋白灰度值由高到低依次为:药物镇痛组>电针夹脊穴组/电针三阴交加合谷组>空白对照组。 结论: 1.电针可延长分娩大鼠的痛阈值,起到镇痛作用。 2.电针刺激可降低脊髓中信号分子Raf、ERK、CREB的mRNA表达含量和蛋白表达量,提高子宫肌层组织中效应分子DYN的蛋白表达量。 3.电针主要通过 MAPK/ERK信号通路调控信号分子 Raf、ERK、CREB在脊髓的表达,从而调节效应分子DYN发挥镇痛作用。