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目的:除白血病、淋巴瘤外,骨肉瘤是儿童和青少年最常见的恶性肿瘤。辅助化疗是除手术治疗外最主要的治疗方式。然而对化疗药物抵抗性降低化疗效果,严重影响患者的预后。肿瘤干细胞具有增加的化疗药物的抵抗性。FoxM1是一种促增殖因子并参与细胞周期的调控。新发现,FoxM1表达增加可增强耐药性,抑制其表达降低耐药性。因此,探讨FoxM1是否通过促进肿瘤干细胞化而参与骨肉瘤细胞对顺铂的耐药。FoxM1抑制剂能否逆转骨肉瘤的耐药性进而增强对顺铂的敏感性。方法:1. 选用骨肉瘤的细胞系MG-63。采用递增顺铂药物浓度,逐步筛选对顺铂耐药细胞MG-63R;2. 选取细胞系MG-63。运用慢病毒转染FoxM1建立稳定过表达MG-63F细胞及空载体对照MG-63V。3. MTT检测在顺铂条件下细胞增殖,测半数致死药物浓度,比较细胞对顺铂药物敏感性。4. Western blot测FoxM1及肿瘤干细胞相关标记物Sox-2、Nanog、Oct-4蛋白水平表达。5. 无血清培养悬浮克隆球实验检测微球形成能力,反映肿瘤干细胞的特性;6. 运用Thiostrepton（FoxM1抑制剂）处理后检测半数致死药物浓度、肿瘤干细胞相关标记物表达水平、成球能力的变化。7. 在安徽医科大学附属医院调取59例2008年5月至2016年12月存档的骨肉瘤标本和搜集临床病理资料;免疫组化（IHC）测在骨肉瘤组织中FoxM1、Sox-2表达;制作Kaplan-Meier生存曲线分析Sox-2表达与临床预后关系;采用Spearman秩和检验骨肉瘤组织中FoxM1的表达与Sox-2表达的相关性。结果:1.在2μg/m L质量浓度的顺铂下稳定生长的耐药细胞MG-63R的IC50（半数有效抑制浓度）由亲本细胞中1.27升为7.36;FoxM1蛋白水平在MG-63R细胞中表达较MG-63细胞明显增高。2.相比MG-63细胞,MG-63R细胞中肿瘤干细胞相关标志物Sox-2、Oct-4、Nanog蛋白水平的表达明显升高,同时平均悬浮克隆球数量明显增多。3.成功建立过表达FoxM1细胞MG-63F,其FoxM1蛋白表达较对照MG-63V明显增高;而4μmol/L硫链丝菌素（Thiostrepton）处理MG-63F细胞后,FoxM1蛋白表达明显减少。4.MG-63F细胞较对照MG-63V细胞,其肿瘤干细胞相关标记物也明显升高,平均悬浮克隆球数量由14增加到25;MG-63F细胞对顺铂敏感性明显降低,IC50由对照组0.96升高为31.23。5.4μmol/L硫链丝菌素处理MG-63F细胞后,对顺铂的敏感性明显增加,同时肿瘤干细胞相关标记物表达明显降低,平均悬浮克隆球数目也明显减少。6.FoxM1、Sox-2的表达均与性别、年龄、肿瘤大小、部位等临床病理特征无相关性。同Ⅰ、Ⅱ期患者比较,Ⅲ期患者中FoxM1高阳性率明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。而同Ⅰ、Ⅱ期患者比较,Ⅲ期患者中Sox-2高阳性率明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。生存曲线显示Sox-2表达水平越高,则总生存率越低（P<0.05）。Sox-2表达水平与FoxM1表达水平呈正相关。结论:1、FoxM1的过表达可能通过促进肿瘤干细胞化而参与骨肉瘤细胞对顺铂耐药;2、Thiostrepton可能通过逆转肿瘤干细胞化而增强骨肉瘤耐药细胞对顺铂的敏感性。