【摘 要】
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目的:通过观察CPB后大鼠肺组织损伤程度、相关炎症因子及自噬蛋白的变化,探讨大鼠体外循环肺损伤是否与自噬激活有关。方法:挑选18只健康的雄性SD大鼠（350～450g）,随机平均分为3组:Sham组、CPB组和IR组。每只大鼠用1%戊巴比妥进行麻醉,行气管插管辅助通气。Sham组行动静脉穿刺置管和气管插管,暴露左侧肺组织。CPB组做股动静脉和颈总动脉穿刺置管、气管插管和暴露左肺,需进行体外循环操作
【基金项目】
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国家自然科学基金（82060083）乙酰转移酶p300调控肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬在大鼠体外循环肺损伤中的作用及机制研究；
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目的:通过观察CPB后大鼠肺组织损伤程度、相关炎症因子及自噬蛋白的变化,探讨大鼠体外循环肺损伤是否与自噬激活有关。方法:挑选18只健康的雄性SD大鼠（350～450g）,随机平均分为3组:Sham组、CPB组和IR组。每只大鼠用1%戊巴比妥进行麻醉,行气管插管辅助通气。Sham组行动静脉穿刺置管和气管插管,暴露左侧肺组织。CPB组做股动静脉和颈总动脉穿刺置管、气管插管和暴露左肺,需进行体外循环操作。IR组做股动静脉和颈总动脉穿刺置管、气管插管和暴露左肺,同时在体外循环中夹闭左侧肺门,再开放左肺门,建立体外循环左肺缺血再灌注损伤模型。于T1、T2和T3时刻采集外周动脉血做血气检查,计算呼吸指数和氧合指数。且于实验结束后用ELISA法检测左肺组织匀浆中MCP-1浓度,和左肺BALF中总蛋白、TNF-α及IL-6的浓度。用WB检测方法检测左肺组织中自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1及ATG-5的浓度。光镜下检查大鼠左肺组织受损程度,电镜检测左肺组织自噬小体的变化情况。结果:（1）HR及MAP变化:CPB组和IR组在T2和T3时间的HR和MAP低于Sham组（P＜0.05）。IR组大鼠在T2和T3时刻HR和MAP低于CPB组（P＜0.05）。（2）肺功能变化:CPB组和IR组在T2、T3时刻氧合指数低于Sham组,呼吸指数高于Sham组（P＜0.05）;IR组在T2、T3时刻氧合指数低于CPB组,呼吸指数低于CPB组（P＜0.05）。（3）光镜结果和病理评分:假手术组肺组织结构正常;CPB组肺间质轻度水肿;IR组肺组织结构严重破坏,肺间质明显水肿,有大量细胞渗出。与Sham组比,其他各组的病理评分均明显升高,且IR组高于CPB组（P＜0.05）。（4）肺组织电镜结果:Sham组见少量自噬体和自噬溶酶体;CPB组见较多自噬体和自噬溶酶体;IR组见大量自噬体和自噬溶酶体。（5）左肺组织匀浆中MCP-1浓度:与Sham组相比,CPB组及IR组左肺组织匀浆中MCP-1含量上升（P＜0.05）;与CPB组相比,IR组左肺组织匀浆中MCP-1含量上升（P＜0.05）。（6）左肺BALF中TNF-α、IL-6和总蛋白浓度:与Sham组相比,CPB组及IR组BALF中TNF-α、IL-6和总蛋白浓度明显升高（P＜0.05）;与CPB组相比,IR组BALF中TNF-α、IL-6和总蛋白浓度明显升高（P＜0.05）。（7）左肺组织中Beclin-1、ATG-5及LC3B的表达:与Sham组相比,CPB组及IR组大鼠左肺组织中Beclin-1、ATG-5及LC3B的表达增加（P＜0.05）;与CPB组相比,IR组大鼠肺组织中的Beclin-1、ATG-5及LC3B的表达增加（P＜0.05）。结论:（1）CPB可使大鼠肺功能降低、肺结构破坏、炎症因子表达增加,造成大鼠肺组织损伤。（2）CPB后大鼠肺组织自噬小体及自噬相关蛋白的表达增加,自噬激活;同时肺功能下降,肺部炎症严重导致肺损伤。
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