Nogo基因及其信号通路蛋白在小鼠耳蜗表达的初步研究

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目的:通过观察Nogo基因转录体Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C,及Nogo各信号通路关键蛋白质在小鼠耳蜗的表达情况,探讨Nogo基因在小鼠耳蜗表达的主要转录体和主要信号通路。方法:将小鼠分为出生后3天、7天、2周、4周、8周共5组,取耳蜗,Trizol法提取RNA,后逆转录合成cDNA,然后行荧光定量PCR扩增Nogo的三个转录体Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C,及Nogo受体NgR、PirB、GPR50和Nogo氨基端整合素α4、αv、α5。根据PCR结果,对Nogo基因各转录体及其受体和氨基端整合素这些信号通路关键蛋白质在出生后不同龄小鼠耳蜗的表达进行相对定量分析。结果:1.Nogo三个转录体在小鼠耳蜗均有mRNA水平表达,比较在3天组耳蜗表达量的相对值,Nogo-A (0.185±0.0070)、Nogo-B(0.175±0.0060)的表达量明显高于Nogo-C (0.011±0.0010)(P<0.05)。比较在各年龄组,Nogo-A在3天组耳蜗(0.185±0.0070)显著高于7天组(0.046±0.0025)(P<0.05),3天组和7天组显著高于2周组(0.011±0.001)、4周组(0.010±0.0009)、8周组(0.009±0.0008)(P<0.05),而在后3个组耳蜗的表达无明显差异(P>0.05)。Nogo-B在3天组耳蜗(0.175±0.0060)显著高于7天组(0.040±0.0018)(P<0.05),3天组和7天组显著高于在2周组(0.010±0.0010)、4周组(0.009±0.0008)、8周组(0.009±0.0009)(P<0.05),后3个组的表达量无明显差异(P>0.05)。Nogo-A和Nogo-B在小鼠耳蜗的表达随着出生后年龄的增长,表达水平逐渐降低,到2周时表达水平基本稳定。Nogo-C在3天组耳蜗表达量(0.011±0.0001)与7天组(0.010±0.0008)、2周组(0.009±0.0007)、4周组(0.010±0.0007)、8周组(0.010±0.0008)的差异无统计学意义(P>0.05)2.Nogo的三个受体蛋白NgR、PirB、GPR50及氨基端整合素α4、αv、α5在小鼠耳蜗均表达,比较在3天组耳蜗的表达,NgR(0.011±0.0010)、 PirB (0.010±0.0008)、GPR50(0.009±0.0008). a4(0.011±0.0009) av (0.009±0.0007)、a5(0.008±0.0006)的表达相互之间无统计学差异(P>0.05)。结论:1.Nogo在小鼠耳蜗的表达以Nogo-A、Nogo-B为主,两者的表达随着出生后年龄的增长,表达水平逐渐降低,到2周时基本接近稳定。2.Nogo-NgR、Nogo-PirB、Nogo-GPR50和Nogo氨基端信号通路在小鼠耳蜗都存在,但是否以某种或某些信号通路为主,还有待进一步研究。
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