四逆散、枳实芍药散、芍药甘草散干预实验性溃疡性结肠炎药效机制初步研究

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目的:借助实验性UC模型,在考察四逆散、枳实芍药散、芍药甘草散三方干预实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型的效应强度,初步探讨上述三首方剂干预实验性UC的作用机制。同时,藉以研究四逆散的效用与枳实芍药散、芍药甘草散之间的关系,进而探讨复方与其基本方之间的关系。材料与方法:SPF级SD大鼠60只,按体重随机分为正常组、模型组、固肠止泻丸组、四逆散组、枳实芍药散组、芍药甘草散组6组,每组10只,雌雄各半。采用免疫法建立实验模型。每周根据大鼠体重变化调整给药量。通过肉眼观察实验大鼠一般状况及其结肠组织大体情况,并依据“结肠组织损伤程度评分标准”进行评分比较;光镜下观察结肠组织病理变化,并通过“结肠病理组织学评分标准”进行评分比较;用免疫组化法检测实验大鼠结肠黏膜组织中κ基因结合核因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB) p65的活性表达;ELISA法测定实验大鼠血清细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)及其血管内皮细胞黏附分子-1(vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1)的蛋白活性。结果:1.一般状态:四逆散、枳实芍药散、芍药甘草散均可有效改善溃疡性结肠炎大鼠形体消瘦,食欲欠佳,精神萎靡,毛发蓬松无光泽,喜扎堆、拱背,大便稀软、便血等症状和体征。2.结肠组织损伤程度:四逆散组、枳实芍药散组、芍药甘草散组大鼠结肠组织损伤程度评分明显低于模型组(P﹤0.05),四逆散组、枳实芍药散组大鼠结肠病理组织学评分亦明显低于模型组(P﹤0.05);枳实芍药散组、芍药甘草散组大鼠结肠病理组织学评分均明显高于四逆散组(P﹤0.05)。3.结肠组织NF-κB活性:四逆散组、枳实芍药散组、芍药甘草散组大鼠结肠组织NF-κBp65活性明显低于模型组(P﹤0.05);枳实芍药散组、芍药甘草散组大鼠结肠组织NF-κBp65活性明显高于四逆散组(P﹤0.05)。4.大鼠血清ICAM-1、VCAM-1表达:四逆散组、枳实芍药散组、芍药甘草散组大鼠血清ICAM-1、VCAM-1含量均明显低于模型组(P﹤0.05);枳实芍药散组大鼠血清VCAM-1含量明显低于四逆散组(P﹤0.05);芍药甘草散组大鼠血清VCAM-1含量明显高于枳实芍药散组(P﹤0.05)。结论:1.四逆散、枳实芍药散、芍药甘草散均能有效干预实验性溃疡性结肠炎,其机制可能为抑制NF-kB活性,减少ICAM-1、VCAM-1表达,从而阻断炎症反应。2.四逆散与枳实芍药散和芍药甘草散在改善UC大鼠病变程度、抑制UC大鼠结肠组织NF-κB的活性方面呈现协同作用。3.在抑制UC大鼠血清细胞黏附分子的作用方面,四逆散与枳实芍药散呈现拮抗作用、与芍药甘草散呈现叠加作用。
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